豆瓣绿组织培养配方筛选研究-论文.pdf

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1、现代农业科技2014年第11期林业科学豆瓣绿组织培养配方筛选研究汤楷郑运欢黄茜莉郭英铎(广东省汕头市农业科学研究所，广东汕头515000)摘要以豆瓣绿叶柄基部、叶片为外植体，采用组培快繁技术，研究了6-BA及各种添加物对豆瓣绿的植株诱导、不定芽分化及生根培养的影响。结果表明：豆瓣绿的组织培养应选取叶柄基部为宜，诱导适宜培养基配方为：MS+6一BA3．0mg／L；芽继代增殖适宜培养基配方为：花宝l号30L+香蕉25g／L+-6铃薯25g／L+性炭lg／L；生根适宜培养基配方为：花宝1号30g／L+~蕉50L+马铃薯50g／L+'／~性炭1L。关键词豆瓣绿：外植体：组织培养中图分类号Q813．1

2、+2文献标识码A文章编号1007—5739(2014)11-0171-02豆瓣绿(Peperomiaobtusifolia)又名豆瓣如意、网瓣金钗、步研究，本试验以叶柄基部、叶片为外植体，对豆瓣绿的组椒草、翡翠椒草，属胡椒科(Piperaceae)豆瓣绿属(Peperomia)，培快繁技术进行初步研究，以满足生产需要。原产于两印度群岛、巴拿马、巴西和阿根延等南美洲北部。1材料与方法豆瓣绿是小型一年生或多年生常绿簇生草本植物，一般作1．1试验材料为盆栽装饰用，适用于室内观赏【3-4]。药用可以止咳祛痰，祛供试材料：生长健壮、无病虫危害的豆瓣绿植株。供试风除湿，外用可冶跌打损伤、骨折。目前，豆瓣

3、绿多用扦插和培养基：以MS(诱导培养和继代培养)和花宝1号(继代培分株的方法进行繁殖，但这些方法苗体整齐度较差，增殖系养)作为基本培养基，试验使用的培养基成分见表I。数低，无法满足规模化生产的需要。国内目前正开始逐步重1．2试验方法视对胡椒科植物的组织培养工作并取得了一定的成绩，但1．2．1外植体的处理。以叶柄基部、叶片为外植体，将叶片、大部分还处于初步探索的阶段，有关胡椒科植物组织培养的叶柄用75％的酒精擦拭数遍，叶片切成1cm的方块，切取报道不多l5_7I。笔者于2010年开始对胡椒科豆瓣绿属进行初叶柄基部约0．5cm的小段，再用10％NaC10溶液消毒表1培养基种类与成分注：花宝1号浓

4、度为30g／L。15min，最后用无菌水冲洗5～8遍。中炼苗。经过炼苗，当根数达到4～5条、植株健壮时即可出1．2．2芽诱导培养。以MS培养基为基础培养基。将处理好瓶[8-9]。出瓶时，用镊子取出小苗，并用流水洗去培养基，移栽的不同外植体分别接种于l、2培养基中。每种培养基15瓶，至已灭菌的水苔中并浇透水。每瓶接1个外植体。接种1周后置于培养温度为(25~2)℃、2结果与分析光照时间为12h／d、光照强度为800～1000lx的培养室中培2．1不定芽的诱导养。分别在接种后15、30、45d观察生长状况并进行记录。将不同外植体分别接入1、2培养基，结果见表2。从表1．2．3继代培养。在无菌条件

5、下，将诱导出来的细小芽点分2中可以看出接种15d后，以叶柄基部为外植体在1、培切成小块，分别接人2、3培养基中进行继代培养，每瓶培养基中已有部分膨大，而以叶片为外植体在1、2培养基中养基接3~4团并均匀摆放。培养环境条件同上。均无明显变化或轻微褐化；接种30d后，以叶柄基部为外植1．2．4生根培养。取健壮的丛生苗，将其切成单苗，转入、体1、培养基中均已出现细小芽点，而以叶片为外植体1、5中进行生根培养，每瓶接种20株。接种后置于培养温度2培养基中均还未出芽且褐化较为严重；接种45d后，培养为(25~2)℃、光照时间为12h／d、光照强度为2000～3000lx基1、2中的以叶柄基部为外植体的

6、均能长出细小芽点。其的培养室中培养。中以2培养基的芽点较多，而以叶片为外植体的则已全部1．2．5出瓶。接种后置于光照强度为5000～6000lx的大棚褐化死亡，可见叶柄基部为豆瓣绿组织培养较好的外植体。表2豆瓣绿外植体不定芽诱导培养情况收稿日期2014—05—04l71林业科学现代农业科技2014年第11期2．2继代培养接种35d后观察，2、3培养基中的细小芽点均已分化成苗(表3)。其中以3为最多，但苗体较小、较弱，出现此种现象可能是由于增殖过于旺盛，经过多次分瓶后植株可以复壮。有时在经过多次继代增殖后．少部分幼苗会有根系长出，出现此种现象可能与品种特性有关(图la)。表3豆瓣绿继代幼苗培养

7、情况ab图1豆瓣绿增殖苗(a)和生根苗(b)2．3生根培养阶段，其适宜培养基配方为：花宝1号30g／L+香蕉25g／L+将无根苗打散接种于3、培养基中，接种60d后进行马铃薯25g／L+活性炭1g／L；生根壮苗阶段适宜培养基配方调查，其生根及生长状况见表4。为：花宝1号30g／L+香蕉50g门L+马铃薯50g／L+活性炭1g门L。表4豆瓣绿无根苗生根培养及生长情况试验结果表明，在继代增殖阶段和生根壮苗阶段均采