大豆异黄酮对骨质疏松模型大鼠骨量及微观结构的影响-论文.pdf

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1、广东微量元素科学2012盎GUANGDONGWEILIANGYUANSUKEXUE第19卷第3期文章编号：1006—446X(2012)03—0005—07大豆异黄酮对骨质疏松模型大鼠骨量及微观结构的影响张跃进厉芳红高聪颖蒋尚群余清(1．温州医学院，浙江温州325035；2．温州医学院第二附属医院，浙江温州325005)摘要：为研究大豆异黄酮(SI)对骨质疏松模型大鼠骨量及微观结构的影响，将46只雌性SD大鼠双侧摘除卵巢，术后一周按血清总胆固醇水平随机分为5组，分别给予雌激素，低、中、高剂量SI干预并设正常对照组，实验周期为12周，灌胃给药，每周称质量一次，分别在去卵巢、给药4、8

2、周处死时抽取尾静脉血，实验结束后分别测定血清碱性磷酸酶(AKP)活性及骨密度等指标。结果表明，高剂量sI干预对维持大鼠骨密度的作用与雌激素相似，去卵巢后干预sI可提高碱性磷酸酶(AKP)活性并能缓解因去卵巢造成的骨丢失，全视野下骨形态学以雌激素组、高剂量SI干预组与正常组结构最为接近。提示大豆异黄酮对骨质疏松模型大鼠的骨量及微观结构存在一定影响，中、高剂量干预可使骨质疏松模型大鼠血清AKP酶活性增加、逆转因去势造成的骨密度下降，考虑到植物雌激素与哺乳动物的雌激素受体(ER)结合能力低下，采用sI在临床开展干预的剂量与远期效果尚待进一步论证。关键词：大豆异黄酮；骨质疏松模型鼠；骨密度

3、；骨代谢；骨丢失中图分类号：R285．5文献标识码：A绝经后骨质疏松症(postmenopausalosteoporosis，简称PMOP)是老年女性人群中常见的一种代谢性骨病，属于原发性骨质疏松，常导致髋关节、脊柱或手腕在轻微伤后发生骨折，造成功能丧失或残疾，直接影响老年人群生存质量。因此，有关PMOP的防治研究具有非常重要的临床价值与现实意义。PMOP主要由于绝经女性体内卵巢功能低下，雌激素水平下降，骨吸收大于骨形成所致，而激素替代疗法存在安全隐患，故寻找替代品一直为人们所期望。大豆异黄酮(soybeanisoflavones，简称SI)作为植物雌激素，因其化学结构能与雌激素受

4、体(ER)竞争性结合一直为人们所关注，但有关SI的一些研究通常受到实验设计与研究样本量小等问题，结论一直存在的争议，致使I临床应用时仍存问题。因此，本实验采用骨质疏松模型大鼠模拟妇女绝经状况，在高脂饲料饲养的协同作用下，观察低雌激素水平下sI对骨密度(bonemineraldensity，简称BMD)、骨矿盐含量代谢(bonemineralcontent，简称BMC)及骨形态学的影响，借此为临床采用sI作为雌激素替代品预防绝经后骨质疏松症提供依据。1材料及方法收稿日期：2012——02——08基金项目：温州市鹿城科技局(S080113)、浙江省中医药管理局(2007CB179)提供

5、作者简介：张跃进(1960一)，女，研究方向：实验诊断。通讯作者：余清，教授，研究方向：人群营养。E—mail：yuqing@wzmc．net·5·广东微量元素科学GUANGDONGWEILIANGYUANSUKEXUE第19卷第3期1．1对象1．1．1动物饲养选择体质量在182．4—215．6(203．12±17．12)g的sD雌性大鼠50只[温州医学院实验动物中心提供，合格证号为SYXK(浙)2005—0061]，以基础饲料适应两周后，采尾血测定血清总胆固醇(TC)值并按其水平随机分为5组，每组10只。实验期间所有动物置于同一室内，日进食15g左右，自由饮用去离子水，室温(21

6、4-4)℃，湿度(524-10)％，光照12h，黑暗12h。1．1．2动物造模除对照组外其余各组经腹腔注射2％戊巴比妥钠麻醉后，切除双侧卵巢，对照组采用相同的腹腔手术步骤但不切除卵巢。术后5d始，逐只进行阴道涂片(1次／d)，连续5d，以检查卵巢摘除是否完全，剔除不合格大鼠，共46只大鼠完成全部实验。1．1．3分组及处理卵巢切除后恢复一周，进行不同组别干预处理。雌激素组(EG)：雌二醇40g·kg_。·d_。；低剂量干预组(L—SI)：30mg·kg_。·d_。；中等剂量干预组(M—SI)：90mg·kg_。·d_。；高剂量干预组(H—SI)：270mg·kg_。·d_。；对照组(

7、NG)：正常饲料饲养。干预物采用无离子水配成混悬液，按0．25mL·100g_。·d灌胃，共观察12周。每周称质量1次并调整灌胃量。分别在大鼠去卵巢，给药4、8周，处死动物时抽取静脉血(每次采尾血前空腹12h)，分离血清后进行相关酶学测定，剩余标本置于～70℃冰箱保存。1．2股骨密度测定取右侧全段股骨在同一条件下用双能x线骨密度仪，使用小动物分析软件，测定骨面积、骨矿含量及骨密度。1．3组织取材截取左侧股骨上1／3处，剔除所有软组织，用10％福尔马林固定，10％硝酸浸