大豆异黄酮对糖尿病小鼠肾缺血再灌注损伤的影响-论文.pdf

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1、h勇军等大豆异黄酮对糖尿病小鼠肾缺血再灌注损伤的影响第2期·309·大豆异黄酮对糖尿病小鼠肾缺血再灌注损伤的影响卜勇军杨静静。刘素芳李万里(新乡医学院公共卫生学系,河南新乡453003)(摘要]目的通过建立糖尿病(DM)小鼠肾缺血再灌注损伤模型,观察大豆异黄酮对DM小鼠肾缺血再灌注损伤的影响。方法将健康小鼠随机分为6组:正常对照组(NG),假手术组(Sham),缺血再灌注模型组(DIR),大豆异黄酮低剂量组(SI1,50mg/kg),大豆异黄酮中剂量组(SI2,80me,/kg),大豆异黄酮高剂量组(SI3,10

2、0mg/kg),每组12只。Sham、DIR、SI1、SI2、SI3组一次性尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)55mg/kg,建立DM小鼠模型。每天灌胃给药,SI1、SI2、SI3组依次给予sI5O、80、100mg/kg,NG、Sham、DIR组灌生理盐水,持续6W后,除NG、Sham组外均建立肾缺血再灌注损伤小鼠模型。检测血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)、血总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)等生化指标,免疫组化分析SGK1表达量。结果D1R组Scr、BUN、TC、TG含量明显高于NG组(P<0.05),SI1组

3、与DIR组比较Scr、BUN、TC含量明显降低(P<0.01),SI2、SI3组与DIR组比较TG含量明显降低(P<0.01)。SI各组SGK1的表达量随剂量的增加呈下降趋势,与DIR组比较,SI2、SI3组SGK1的表达量显著下降(P<0.01)。结论大豆异黄酮可降低DM小鼠肾缺血再灌注损伤后SCr、BUN、TC和TG等水平;大豆异黄酮对DM小鼠肾缺血再灌注损伤有保护作用。[关键词]大豆异黄酮;糖尿病;肾;缺血再灌注损伤[中图分类号]11587.1[文献标识码]A[文章编号]1005-9202(2012)02-

4、0309-02;doi:10.3969/j.issn.1005-9202.2012.02.039大豆异黄酮(soyisoflavones,SI)是大豆生长中形成的一类济千屏影像公司)。次生代谢产物,其结构与雌激素相似,能与雌激素受体结合,具1.2动物模型及分组健康雄性小鼠适应性喂养7d后,随有雌激素效应,故称之为植物雌激素。sI的雌激素样作用影响机分为:正常对照组(NG);假手术组(Sham);缺血再灌注模型到机体的激素分泌、代谢、蛋白质合成、生长因子活性等。sI的组(DIR);SI剂量组(SI1,50mg/kg

5、);sI中剂量组(SI2,生物学作用,如抗氧化、抗肿瘤、抗突变、保护心血管等,对人们80mg/kg);SI高剂量组(SI3,100mg/kg),每组12只。Sham、的健康特别是预防慢性病起着重要的作用。肾缺血再灌DIR、SI1、SI2、SI3组一次性尾静脉注射STZ55mkg(STZ溶注损伤是临床上肾移植、低血容量性休克、糖尿病肾病、严重烧于0.1moL/L枸橼酸缓冲液),不同时间通过尾静脉采血检测空伤等发生急性肾衰竭的主要病理生理基础。因此,深入揭示其腹血糖。选取血糖值>11.1mmo~L的小鼠作为高血糖模型

6、小损伤性变化并寻求防治方法十分重要。本实验拟研究sI对糖鼠j。此后,每天灌胃给药,SI1、SI2、SI3组依次给sI尿病肾脏缺血再灌注损伤的保护作用。50mg/kg、80mg/kg、100mg/kg,NG、Sham、DIR组灌生理盐水。持续6W后,除NG、Sham组外均建立肾缺血再灌注损伤小鼠模1材料与方法型:游离双肾,用动脉夹夹闭右。肾动脉30rain,恢复供血1h后,1.1材料各组摘取双侧肾脏、脾脏及胸腺,称重。计算脾脏、胸腺及肾脏1.1.1动物6—8周龄,清洁级健康昆明种雄性小鼠,体重指数。(20±1)g(

7、新乡医学院实验动物中心提供)。1.3免疫组织化学染色及图像分析采用免疫组织化学1.1.2试剂与仪器sI[大连绿峰天然生物制品有限公司,sISABC法DAB显色、苏木精复染。切片常规脱蜡至水,阻断内总含量41.56%,用二甲基亚砜(DMSO)将sI配成浓度为4g/L源性过氧化物酶及抗原修复。滴加一抗SGK1、二抗羊抗兔的储备液,然后用DMEM培养液稀释至所需浓度];链脲佐菌IgG,以ABC法显色,苏木素复染细胞核,常规脱水透明封片。素(STZ,Sigma公司);DMSO(各组给药液中的终浓度为对各组SGK1表达量进

8、行分析。检测方法:将DAB显色玻片0.5%);兔抗小鼠SGK1多克隆抗体(Upstate);辣根过氧化物置于光学显微镜下,采用彩色图文分析系统对细胞着色的深棕酶标记的羊抗兔lgG;羊抗小鼠IgG抗体(北京中山生物技术有色颗粒的各参数进行图像分析,以实面积构成比代表密度,面限公司);其他试剂均为国产分析纯;血总胆固醇(TC)、甘油三积百分比代表含量。酯(TG)测定试剂盒(南

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