大豆茎秆可溶性糖含量与株高关系研究-论文.pdf

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1、核农学报2013,27(5):0694—0697JournalofNuclearAgriculturalSciences文章编号:1000-8551(2013)05-0694-04大豆茎秆可溶性糖含量与株高关系研究龙施华杨正坤郝再彬(桂林理工大学化学与生物工程学院,广西桂林541004)摘要:为研究大豆茎秆可溶性糖含量与株高的关系,利用高效液相色谱一蒸发光散射器(HPLC-ELSD)对其可溶性糖含量进行了检测。对原品种和突变体的株高调查及茎中可溶性糖含量的测定,结果发现,原品种的株高及茎中可溶性糖含量均高于突变体。研究表明,茎中糖

2、含量与茎的高度相关。关键词:HPIC·ELSD;茎;突变体;可溶性糖大豆(GlycinemⅡMerril1),豆科一.·年生草本,双子采用HPLC.ELSD法快速、直接测定大豆茎中多种糖含叶植物,素以高油、高蛋白和氨基酸组成成分均衡而著量,旨在研究矮秆大豆突变体茎可溶性糖与原品种的称。大豆一直是低产作物,世界大豆平均单产为差异,揭示大豆茎可溶性糖含量与株高的关系。2200kg·hm~,而我国仅为1600kg·hm~。一般认为,株高与栽培密度、产量、作物抗倒伏能力有关,株高越1材料与方法高抗倒伏能力就越差。碳水化合物代谢是植物生长发

3、育的重要组成部分,可溶性糖是植物体内最活跃的一1.1试验材料类碳水化合物,也是碳代谢的重要产物之一。它既可原品种:大豆品种东农42(Glycinemaxcv.以作为细胞内重要的营养物质,又可以参与植物细胞Dongnong42);矮秆突变体:东泽11号(HK808)。的渗透调节。相关研究表明,蓖麻生育前期可溶性糖2011年5—10月,在东北农业大学香坊农场基地的积累有利于植株长高⋯。种植。2个大豆试验材料采用小区对比相邻种植(问糖是大豆茎秆中重要的组成成分,准确测定大豆比重复法,即原品种与矮秆突变体相临种植)。行距茎秆中糖的组成对于

4、研究大豆矮秆突变体具有重要意65cm、行长10m,株距5cm,单株,5行区,3次重复。义。糖含量的测定方法有容量法、比色法、旋光法、气成熟期采样,收集大豆茎,液氮冷冻后置于冷冻干燥器相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)等。一般化中干燥,然后粉碎,过8O目筛,一20℃冰柜保存备用。学法只能测定各种糖的总量而不能测定糖的组分。播种第l0周照相,调查株高。GC虽可分别测定不同糖的含量且灵敏度高,但由于糖1.2仪器与试剂类化合物沸点高等特点,必须进行衍生化反应才可检LC一20AB高效液相色谱仪、蒸发光散射检测器测,这使GC的实际应

5、用受到了很大的限制。目ELSD—LTII(日本岛津公司);KQ一500型超声波清洗前,已有报道利用HPLC分析检测菠萝、烟草、高粱等器(昆山市超声仪器有限公司);FD一1冷冻干燥机植物中不同糖的含量。由于糖本身在紫外区无吸(北京德天佑科技发展有限公司);FW100高速万能粉收,故在用HPLC测定糖时通常使用示差折光检测器碎机(天津市泰斯特仪器有限公司);BS223S电子天(RID)进行检测¨,但RID检测灵敏度较低,受外界平[赛多利斯科学仪器(北京)有限公司];HH-42快速因素影响较大,蒸发光散射检测器(ELSD)作为一种新恒温

6、数显水箱(常州国华电器有限公司);Molcell细型的通用型质量检测器,稳定性好,灵敏度高,无溶剂胞型超纯水机(上海摩勒生物科技有限公司);氮气峰干扰,弥补了HPLC传统检测器的不足¨。本研究(99.9%,广西桂林海湾恒日化工气体有限公司)。收稿日期:2012-06-29接受日期:2013-01-28基金项目:国家自然科学基金(31060193)作者简介:龙施华(1984一).女,广西玉林人,硕士研究生,主要研究生物活性物质,E-mail:longshihua08@163.corn通讯作者:郝再彬(1958-),男,黑龙江哈尔滨人

7、,硕士,教授,主要研究生物活性物质,E-mail:haozaibin2010@126.COn15期大豆茎秆可溶性糖含量与株高关系研究695D一葡萄糖、D一果糖和蔗糖标准品(纯度≥98%)果表明,原品种为80.2±4.5cm,突变体为48.7±均购自中国药品生物制品检定所;乙腈(色谱级);实3.2cm,两者相差31.5era(图1),株高差异达到极显验用水均为超纯水。著水平(P<0.01)。1.3方法1.3.1色谱条件参照文献[11]的方法改良为:YMC—PackNH,柱(4.6ram×250mm,5I.Lm);流动相为V(乙腈):

8、V(水)=80:20;流速为O.8mL·min~;柱温为40;进样量为lOlL;蒸发光散射检测器(ELSD)的漂移管温度为4O~C;载气为氮气,压力为345~350kPa。1.3.2标准溶液的配制准确称取10.0mg各标准品,用超纯水溶解并定容于l

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