[精品]茶氨酸分析方法.doc

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1、5.试验方法5.1茶氨酸含量5.1.1标样的配制精确称量茶氨酸10mg,用蒸镭水溶解，并定容至100ml的容量瓶屮，过滤。此标准溶液的的浓度为O.lmg/ml.5.1.2OPA试剂的配制O-phthalaldehyde（OPA）:lOOmg疏基乙醇:100ul硼酸缓冲溶液：PH10.00:20ml准确称取OPA试剂100mg,加2.5ml甲醇溶解后，加入lOOul的2■銃基乙醇,再用0.1M硼酸缓冲溶液定容至25ml,过滤，即成为OPA试剂5.1.3流动相的配制A：10mM磷酸缓冲溶液（PH60）+乙月青称

2、取1.56gNaH2PO4.2H2O,用1000ml蒸锚水溶解，用0.1%的NaOH调节PH值至6.0,加入60ml乙睛.混合均匀后，用超声波至少脱气30min以上.B：60%已膳+40%的蒸憎水,混合均匀后至少脱气30min以上5.1.4梯度混合程序Time(min)A(%)B(%)0851520752529455530010035Stop5.1.5色谱条件色谱柱：CLC-ODS150*6.0反相色谱柱.柱温：40°C流动相：A,B两溶液梯度混合。流速：1.0ml/min荧光检测波长激发波长：340nm检

3、测波长：455nm进样量：10ul色谱工作站:N2000-浙大5.1.6样品制备准确称取0.1OOOg的样品，用去离子水溶解并定容至100ml的容量瓶屮,摇匀,并用0.2u的膜过滤后.在2ml反应瓶屮加入200ul样品溶液撚后加入200ul的OPA试剂.摇匀并反应lmin屮后，立即进样.5.1.7结果计算茶氨酸含量（％）二—x比竺x100%AiWsAs:样品茶氨酸的峰而积Ai:标准样晶的峰面积Wi:标准样品重量(g)K:标样的纯度.