蚜虫全蛋白提取方法的比较研究

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1、环境昆虫学报JournalofEnvironmentalEntomology，June2010，32(3)：353—356ISSN1674-0858doi：10．3969／i．issn．1674—0858．2010．03．010蚜虫全蛋白提取方法的比较研究安少利，潘怡欧，许鹏，张炬红，席景会(吉林大学植物科学学院，长春130062)摘要：为建立适于SDS—PAGE分析的蚜虫蛋白质样品制备平台，以便为蚜虫蛋白质的双向电泳分析奠定基础，本研究比较了TCA／丙酮沉淀、PEG提取、饱和酚抽提和直接裂解4种蛋白质提取方法。结

2、果表明：不同样品制备方法的蛋白提取率有显著的差异，其中直接裂解法的提取率最高，为17．43ms／g；其次是饱和酚抽提法，提取率为12．30ms／g；而PEG制备法提取率最低，只有7．96ms／g。利用SDS—PAGE电泳对不同的蛋白质样品进行了分析，发现在凝胶图谱上显现的条带也有明显的差异，其中饱和酚抽提法显现的条带数最多，为36条，且从14．4kDa～116．0kDa范围有广泛分布，条带清晰；PEG提取法条带数为30条，一些蛋白条带丢失或不明显；TCA／丙酮沉淀法的蛋白条带集中分布在25．0kDa一67．0kDa

3、区域；直接裂解法条带数仅为24条，且小分子量的条带可辩率很低。通过以上结果可以得出，饱和酚抽提法最适用于蚜虫全蛋白样品的制备。关键词：蚜虫；蛋白提取；电泳中图分类号：Q966文献标识码：A文章编号：1674-0858(2010)03-0353-04AcomparisonofproteinextractionmethodssuitableforaphidproteinsANShao—Li，PANYi—Ou，XUPeng，ZHANGJu—Hong，XIJing—Hui(CollegeofPlantScience，Jil

4、inU-niversity，Changchun130062，China)Abstract：ToestablishasuitablepreparationplatformofaphidproteinsampleforSDS—PAGEanalysis，wecomparedfourproteinextractionmethods：TCA／acetoneprecipitation，PEG，saturatedphenol，anddirectdecompositionmethod．Theresultsindicatedthat

5、，extractionrateofdiferentproteinpreparationmethodsweresignificantdifferentbystatisticalanalysis．Thedirectdecompositionmethodpresentedthehighestyieldof17．43mg／g，followedbythesaturatedphenolextraction，12．30mg／g．TheyieldofPEGextractionmethodwasthelowest。only7．96m

6、g／g．Therewasalsoanobviousdifferenceinproteinbandsofsamplesfromdifferentproteinpreparationmethods．analyzedbySDS—PAGEelectrophoresis．Thesat—uratedphenolextractionmethodshowedmost，36bands。broadlyandclearlydistributingfrom14．4kDato116．0kDarange．ThePEGextractionmet

7、hodshowed30proteinbands．anumberofbandswaslostorbecameunapparent．ProteinbandsofTCA／acetoneprecipitationmethodconcentratedinthe25．0kDa一67．0kDaregion．Thedirectdecompositionmethodwasonly24bands．andthebandsofsmallmolecularweightproteinwithlowresolution．Theseresults

8、displayedthatthesaturatedphenolextractionwasthemostappropriatemethodforaphidproteinpreparationforSDS—PAGEanalysis．Keywords：aphid；proteinextraction；SDS—PAGE昆虫蛋白制备方法较多，但主要集中于食用蛋样品制备的