天津地区住院腹泻儿童轮状病毒的检测及其毒株型别分析

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1、·752·中华检验医学杂志2010年8月第33卷第8期ChinJLabMed。August2010．Vo1．33．No．8．临床实验诊断研究．天津地区住院腹泻儿童轮状病毒的检测及其毒株型别分析马慧欧阳雅博林书祥李丽静王瑞雪彭林李君文【摘要】目的了解天津地区5岁以下住院腹泻患儿A组RV的感染情况及其型别特点。方法收集天津市儿童医院2008年5月至2009年4月837份住院腹泻患儿的粪便标本，用胶体金免疫层析法快速检测A组RV抗原，将检测阳性的标本进行细胞培养，产生细胞病变(CPE)后，提取病毒RNA，RT-PCR扩增病毒VP7基因，并将PCR产物阳性标本测序，证实其V

2、P7(G)血清型。同时收集其临床相关资料。结果837份标本RV抗原阳性率为26．3％(220／837)；90．5％(199／220)的RV腹泻发生在24月龄以下患儿；发病高峰时间主要集中在2008年10月至2009年4月；208份接种的RV抗原阳性标本中，病毒分离后用PCR鉴定阳性95份，对其中35份电泳较好的PCR产物阳性标本作序列分析，除1份为G9型、2份为G3型外，其余均为RVG1型。结论RV是天津地区婴幼儿腹泻的重要病原，流行的基因型以G1为主。【关键词】轮状病毒感染；轮状病毒属；基因型；逆转录聚合酶链反应；病毒培养Detectionandgenotypin

3、gofrotavirusamongchildrenunder5yearsoldhospitalizedwithdiarrheainTianjinMAHuiOUYANGYa—bo．HNShu—xiang，LILi-jingWANGRui—xl2,e，pENGLinLIJun—wel1．DepartmentofLaboratoryMedic珊．TianjinChildrensHospital，死0nfin300074，CinaCorrespondingauthor：PENGLin。EmaiZ：lpenloCch@yahoo．con【Abstract】ObjectiveT

4、ostudytheprevalenceandgenotypesofrotavirus(RV)amongchildren，<5yearsoldhospitalizedwithviraldiarrheainTianjin．MethodsSt0olspecimenswerecollectedfromhospitalizeddiarheachildreninTianjinchildrenshospitalbetweenMay2008andApril20o9．DetectionofrotaviruswasemployedbyColloidalGoldDevice．Thedet

5、ectedpositiveswereinoculatedtoMA．104cells．ThetotalRNAofviruswasextractedafterCPEwhichwascausedbyrotaviruswereobserved．TheVP7serotypesweredeterminedbyusingRT-PCRtoamplifytheVP7geneandsequencingtheRT—PCRproducts．Theclinicaldataforeachpatientwerealsocollected．ResultsAmong837specimens，theR

6、Vantigenpositiveratewas26．3％(220／837)．Amongallthechildrenwithrotavirusdiarhea，90．5％(199／220)were<2yearsold．ThepreyalenceofrotavirusdiarrheainchildrenpeakedduringOct．2008throughApr．2009．Ofthe208rotaviruspositivespecimens，95weresuccessfullyidentifiedbyRT—PCR．rhiny—fivepositivestrainsofRV

7、weresequenced。andthesequencingresultsshowedthat32positivestrainswerebelongedtorotavirusG1type，2positivestrainswerebelongedtorotavirusG3typeand1positivestrainwerebelongedtorotavirusG9type．Conclusi0nRVwasthedominantetiologicalagentforinfantilediarrheainfectioninTianjin．andthepredominan