仙台病毒tianjin株及其hn/f基因真核表达质粒对人副流感病毒i型的血清中和实验研究

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1、第l6卷3期天津医科大学学报Vol·16,No~JOURNALOFTIANJINMEDICALUNIVERSⅡ.YSep2010斗^1lj2010年9月.仙台病毒Tianjin株及其HN/F基因真核表达质粒对人副流感病毒I型的血清中和实验研究谌志筠,王芳,李晓眠(天津医科大学微生物学教研室,天津300070)[摘要]目的:探讨仙台病毒Tianjin株(SeV)及其核酸制备预防人副流感病毒I型(hPIV一1)疫苗的可行性。方法:f1)用SeV免疫小鼠3次后取血清,间接ELISA法检测免疫血清抗体效价。(2)将倍比稀释

2、的免疫血清与100TCID~/O.1ml的hPIV~1进行中和实验,观察细胞病变(CPE)并计算50%血清中和终点。(3)构建SeV真核表达质粒pVAX1一F、pVAX1一HN,分别单独或联合免疫小鼠,取免疫血清检测对hPIV一1的中和终点。结果:SeV免疫血清抗体的50%中和终点分别为39.8、12.6、16.0、44.7、25.1;质粒免疫血清抗体的中和作用按pVAX1一HN+pVAX1一F组>pVAX1一HN组>pVAX1一F组依次递减。结论:仙台病毒Tianjin株及其HN基因、F基因真核表达质粒能诱导机体

3、产生抗hPIV一1抗体,有可能成为制备预防hPIV一1疫苗的有效毒株。【关键词]人副流感病毒I型;仙台病毒TianjiJ株;HN基因;F基因;中和实验[中图分类号]R373.1[文献标识码]A[文章编号]1006—8147(2010)03—0413—04NeutralizationtestsofSendaivirus,strainTianjinanditsHN/FgeneeukaryoticexpressionplasmidtohPIV-1CHENZhi—yun,WANGFang,LIXiao-mian(Depar

4、tmentofMicrobiology,TianjinMedicalUniversity,Tianjin300070,China)ABSTRACTObjective:ToexplorethepotentialityofSendaivirus,strainTianjin(SeV)anditsnucleicacidusedtopreparevaccinesofhumanparainfluenzavirusI(hPIV-1).Methods:(1)Miceof3weeksoldwereimmunizedwithSeVfo

5、r3times.SerawereisolatedandtheSeV-specificantibodiesweretestedbyindirectELISA.(2)NeutralizationtestsweredonewiththeimmuneseraandhPIV-1,thenCPEwasobservedand50%serumneutralizationterminationswerecounted.(3)EukaryoticexpressionplasmidpVAX1-F,pVAX1-HNofSeVwerecon

6、structed.Theywereusedincombinationorsingletoimmunemiceandserumneutralizati0nterminationsweretested.Results:50%serumneutralizati0nterminationsofSeVwere39.8,12.6,16.0,44.7,25.1,whichofeukaryoticexpressionplasmidweredecreasedaccordingtopVAX1一HN+pVAX1一Fgroup>pVAX1

7、一HNgroup>pVAX1一Fgroup.Conclusion:Sendaivirus.strainTianjinanditsHN/FgeneeukaryoticexpressionplasmidcaninducetheproductionofhPIV一1antibodies,andthenSendaivirus,strainTianjincouldbeconsideredasacandidatestraintopreparethehPIV-1vaccine.KEYWORDSHumanparainfluenzav

8、irusI;Sendaivirus,strainTianjin;HNgene;Fgene;Neautralization人副流感病毒humanparainfluenzavirus,hPIV)之一。全球每年都有不同亚型的hPIV交替流行Il_,根据遗传学和血清学可分为4型,是儿童急性呼吸其中I型是引起婴幼儿严重哮吼的主要病原,Ⅲ型道感染(acuterespir

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