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1、第39卷第4期酿酒Vol.39.№.42012年7月LIQUORMAKINGJuly，2012文章编号:1002-8110（2012）04-0033-05芝麻香型白酒高温大曲微生物总DNA提取的改良方法*11112221葛媛媛，姚粟，刘洋，李辉，赵纪文，张锋国，信春晖，程池（1.中国食品发酵工业研究院中国工业微生物菌种保藏管理中心,北京100027；2..山东扳倒井股份有限公司，山东淄博256300）摘要:从常温研磨、蛋白酶K和Rnase的加入对传统CTAB法进行改良，并结合试剂盒法，提出了一种高效提取高温大曲微生物总DNA的方法。该方法获得的总基因片段大小约21Kb；A260/A280=
2、1.878;A260/A230=1.706；PCR反应抑制物少，可直接用于16SrDNA的扩增；并通过构建克隆文库技术和变性梯度凝胶电泳（DGGE）分析后发现高温大曲中细菌多样性丰富，能一定程度上反映微生物群落结构和组成。研究结果表明该方法提取的DNA适用于芝麻香高温大曲中微生物的分子生态学研究。关键词：芝麻香型白酒；高温大曲；DNA提取；16SrDNA;DGGE;克隆文库中图分类号：TS1文献标识码：B[1]0背景了多香型的工艺精华，是香型融合的典范，目前其芝麻香型白酒作为我国白酒的创新香型，融合已凭借独特的风味风格成为市场上的新宠，具有很大的发展潜力。然而作为一个新起的创新香型，它尚*
3、基金项目：国家科技支撑计划课题（2012BAK17B11）[2]收稿日期：2012-03-16处于发展初期，对其相关研究有待广泛开展。作者简介：葛媛媛，女，硕士研究生。高温大曲是生产芝麻香型白酒的糖化发酵剂，!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!3结论[9]GB/T10781.2-2006.清香型白酒[S].以清香型发酵酒醅为筛选源，以1790为对照，[10]王月梅,赵迎路.清香型白酒发酵中的酯化研究[J].酿酒科技,2003,115(1):47-49通过平板初筛，发酵力试验复筛，乙酸乙酯生成能力[11]沈怡方.
4、白酒生产技术[M].北京:中国轻工业出版社,1998:19-21测定及代谢风味物质分析，筛选出两株适合清香型[12]李光伟.微生物酯酶产生菌的选育、菌株Bacillussp.EB-87产酶特白酒酿造，高产乙酸乙酯和高产乙酸菌株Ac-47和性及酶学性质的研究[D].浙江:浙江工业大学,2001Ac-19。其中Ac-47还可产少量丙酸和丁酸，Ac-19[13]R.Singh,N.Gupta,Y.K.Goswami,etal.Asimpleactivitystaining还可以产生少量正丙醇、丙酸、丁酸和β-苯乙醇；protocolforlipasesandesterases[J].ApplMi
5、crobiolBiotechnol,2006,(70):679-682经鉴定均为Pichaanomala。[14]吴思方,孙灿,潘立慧.产酯酵母产酯条件的研究[J].武汉食品工业[参考文献]学院学报,1996,(1):25-29[1]施安辉,关纪奎,张文璞,等.徐坊大曲的微生物区系及其优势菌的鉴[15]沈怡方.产酯酵母的研究与应用[J].酿酒,1980,(3):13-16定[J].酿酒科技,2001,108(6):26-28[16]沈怡方.白酒生产技术全书[M].北京:中国轻工业出版社,2007:651[2]陈生碧.提高浓香型大曲酒质量和出酒率的技术措施[J].酿酒科技,[17]唐玉明,姚
6、万春,任道群等.浓香型大曲发酵力测定条件探讨[J].酿2006,149(11):59-60酒科技,1999,78(6):67-69[3]高月明.对清香型白酒地位作用的思考[J].酿酒,2005,32(2):94-96[18]Barnett,J.A..酵母菌的特征与鉴定手册[M].胡瑞卿.青岛:青岛海洋[4]李颖宪,邹海晏,程志娟.清香型白酒的优势、现状与振兴[J].酿酒科大学出版社,1991技,2005,133(7):104-106[19]C.P.Kurtzman,.W.Fell.TheYeasts:ATaxonomicStudy(fourthedition)[M].[5]沈正祥,韩建书.
7、清香型白酒的特点优势及发展趋势[J].酿酒,1997,Netherlands:Springer,2001120(3):7-9[20]沈萍,范秀蓉,李广武等.微生物学实验[M].第三版.北京:高等教育[6]秦含章.清香型白酒在我国酿酒工业中的优越地位[J].中国酒,1996,出版社.1999(5):4-5,15-16[21]周德庆主编.微生物学实验手册.上海科学技术出版社，1986[7]李维青.白酒的香气与香型[J].酿酒
