一种体外分析亚洲玉米螟幼虫血细胞包囊的改进方法

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1、动物学研究2007，Dec.28(6)：675－680CN53-1040/QISSN0254-5853ZoologicalResearch一种体外分析亚洲玉米螟幼虫血细胞包囊的改进方法1，**1，2，**1，*赵华福，刘佳，胡建（1.中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室，广东广州510275；2.东北农业大学农学院，黑龙江哈尔滨，150030）摘要：包囊反应是昆虫清除侵入体内的外源物如病原物和寄生生物的一种非常重要的细胞免疫反应。由于受到不便于观察、操作复杂等问题的限制，很多包囊分析实验无法或难于在昆虫体内完成。

2、体外包囊方法在一定程度上解决了这些问题。目前常用的体外包囊是在96孔板中加入昆虫血细胞和外源物，如凝胶珠进行培养观察，但这种方法存在着一些明显的缺陷。本文以亚洲玉米螟（Ostriniafurnacalis）幼虫血细胞为研究对象，使用0.2mL的离心管（Eppendorftube）代替96孔板，并将其固定在匀速旋转的载体上培养，极大程度的模拟了反应物在昆虫体内的状态。结果表明，改进方法后昆虫血细胞的体外包囊效果得到明显提高，且血细胞的状态也得到明显改善；而添加抗凝剂会减弱血细胞对外源物的包囊能力。关键词：亚洲玉米螟；血细胞；包囊；96

3、孔板；离心管；抗凝剂中图分类号：Q969.432文献标识码：A文章编号：0254-5853-（2007）06-0675-06AnImprovedMethodonEncapsulationAssaysbyLarvalHemocytesfromOstriniafurnacalisinvitro11，21，*ZHAOHua-fu，LIUJia，HUJian（1.StateKeyLaboratoryofBiocontrol，CollegeofLifeScience，SunYat-senUniversity，Guangzhou，510275，

4、China；2.CollageofAgriculture，NorthEastAgriculturalUniversity，Harbin，150030，China）Abstract：Encapsulation,akindofcellularimmunereactionofinsect,playsanimportantroleineliminatingforeignobjectssuchaspathogensandparasiteswhichinvadeinsecthemocoels.Asaresultoflimitedobservat

5、ionandcomplicatedmanipulations,analysisofencapsulationcannotbeeasilyperformedinvivo.Encapsulationinvitroresolvestheseproblemstoacertainextent.Now,encapsulationassaysinvitroareusuallyperformedin96-wellplatesinwhichforeignobjectssuchassephadexbeadsandinsecthemocytesareco

6、ntainedandobserved，butsomeshortcomingsexistinthismethod.Inthispaper，animprovedanalysismethodontheencapsulationofOstriniafurnacalislarvaehemocytesinvitroisintroduced.0.2mLEppendorftubesarethesubstituteforthe96-wellplatesandtheyarefixedtoarevolvingrotatorataspeedof4circl

7、espermin.Thestatesofhemocytesandsephadexbeadsininsect’shemocoelsarereplicatedunderthismethod.Resultsshowedthatthestatesofhemocyteswereimprovedandencapsulationwasenhancedunderthenewmethodandanticoagulantsmightinhibittheencapsulationabilityofhemocytes.Keywords：Insecthemo

8、cytes；Encapsulation；96-wellplate；Eppendorftube；Anticoagulant昆虫在短暂的生命活动中要面临着多种病原菌肽及氮和氧的活性中间产物的产生（Bogdanet微生物、寄生物的威胁，但昆