蒋勇 厌氧菌培养.doc

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1、蒋勇厌氧菌培养河北大学2009级本科生学年论文（课程设计）厌氧菌的培养厌氧菌尚无公认的确切定义，但通常认为这是一类只能在低氧分压的条件下生长，而不能在空气（18%氧气）和（或）10%二氧化碳浓度下的固体培养基表面生长的细菌。按其对氧的耐受程度的不同，可分为专性厌、微需氧厌氧菌和兼性厌氧菌。厌氧微生物在自然界分布广泛，种类繁多，其生理作用日益受到人们的重视⑴。本文介绍了厌氧菌的几种培养方式，及操作流程。关键词：厌氧菌培养生理作用操作流程1河北大学2009级本科生学年论文（课程设计）AbstractThereisnoexactdefinitio

2、nofanaerobicbacteriarecognized,butweusuallythinkthatitisabacteriawhichonlygrowingunderthelowoxygenpartialpressure.Accordingtothedifferentdegreeoftoleraneeforoxygen,whichcanbedividedintoDesignedsexanaerobicbacteria,MicroneedoxygenanaerobicbacteriaandFacultativeanaerobes.Ana

3、erobicmicrobearewidelydistributedinnature,itsphysiologicalfunctionincreaseourattention.Thispaperintroducesseveralkindsofanaerobicbacteriacultivationmode,andoperationprocess.Keywords:AnaerobicbacteriatrainingPhysiologicalfunctionOperationflow2河北大学2009级本科生学年论文（课程设计）-XZ-—1—一冃

4、IJ吞微生物培养的目的各有不同，有些是以大量增殖微生物菌体为目标（如单细胞蛋白或胞内产物），有些则是希望在微生物生长的同时，实现目标代谢产物的大量积累。由于培养目标的不同，在培养方法上也就存在许多差别。厌氧菌在冇氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。通常用培养基屮加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。3河北大学2009级本科生学年论文（课程设计）二本论2.1厌氧菌培养方法的介绍厌氧菌在冇氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。通常用培养基屮加入还原剂，或用物理、化学方法去

5、除环境屮的游离氧，以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用［2］。1.厌氧缸法:接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入庆氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来⑶。1.厌氧袋（Bio・bag）即在塑料袋内造成厌氧环境來培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气，内装气体发生管（有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安甑）、美兰指示剂管、耙催化剂管、干燥剂。放入己接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。先折断气体发生管，

6、后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。如不突变表示袋内己达厌氧状态，可以孵育［4］。2.厌氧手套箱（Anaerobieglovebox）是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装冇两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。欲放物入箱,先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气（H2,C02,N2）达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在

7、耙的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、丿犬氧环境和温度等均系自动调节［5］。3.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售［6］。4.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物（多是植物），消耗氧气,同时产生二氧化碳，供细菌生长用。。1.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌

8、的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。焦性末食子酸与碱反应后耗氧。该法用于厌氧不严4河北大学2009级本科生学年论文（课程设计）格的厌氧菌的培养，简单。如有梭状芽