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《化疗及生物免疫疗法治疗胃癌疗效及对循环肿瘤细胞(CTC)影响.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、环肿瘤细胞(CTC)影响［摘要］目的探讨化疗与生物免疫疗法治疗胃癌的疗效及对循环肿瘤细胞(CTC)的影响。方法将80例胃癌患者分为对照组与观察组，对照组仅采用化疗，观察组联合DC-CIK生物免疫疗法进行治疗。比较两组的疗效及两组治疗前后的CTC水平。结果(1)观察组治疗后的临床总缓解率显著高于对照组(P0.05),具有可比性。1.2治疗方法两组患者均实施常规手术治疗。术后第3周，对照组采用奥沙利钳(L-OHP)+亚叶酸钙A及氟尿喀噪(5-FU)组成的FOLFOX化疗方案。观察组患者在上述治疗基础上联合生物免疫疗法进行治疗：采血分离，抽血前
2、皮下注射150ug的GM-CSF,将PBMC与GM-CSF.IL-4混合置于温度条件为37°C的恒温箱之中培育，3d后完成抗原冲击培育，2d后生成成熟的致敏DC,经2周后再将其回输；在外周血液之中将单个核细胞分离之后，对CIK细胞进行常规培育，1周后再经细胞培育呈阴性，再使用0.9%的NaCl溶液洗涤2〜3次,同rhIL-2—起加入自身血浆之中，于2h以内进行回输。上述生物制剂每个疗程回输2次，每隔5天后进行化疗。1.3临床疗效评价参考世界卫生组织关于癌症患者临床疗效评价标准，主要分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、无变化（NC）及进
3、展（PD）。临床总缓解率（％）=（CR例数+PR例数）/总例数X100%[4]o1.4CTC检测（1）主要材料激光共聚焦扫描显微镜（Laserscanningconfocalmicroscope,LSC）（美国CompuCyte公司），滤器（德国SARTORIUS公司），8Um孔径的聚碳酸酯滤膜（英国Whatman公司）,异硫氧酸荧光素-兔抗人细胞角蛋白抗体（英国Abeam公司）、藻红蛋白（PE）-鼠抗人CD45抗体（美国e-Bioscience公司），CK8抗体（上海瑞齐生物科技有限公司）;4,6-二米基苯基口引噪（DAPI）,MCF-
4、7胃癌细胞株（中科院上海细胞研究所）。（2）标本采集首先将标本采集装置进行严格的消毒处理，使用真空采血针采集受检者肘静脉血10mL,将穿刺后的2niL肘静脉血弃去。肝素抗凝,4£中保存，待检。选择SGC-7901人胃癌细胞株❷❷建模拟胃癌患者血样，这样做的目的就是为了与上述采集标本进行对照，使用膜滤过的方法对肿瘤细胞进行富集。（3）LSC自动扫描和形态学观察以CK8抗体（上海瑞齐生物科技有限公司）和CD45分别对SGC-7901进行筛选，阳性细胞为CK8（+）CD45（-）o经LSC扫描计数肿瘤细胞水平。[4]典型CTC判定标准①CTC细
5、胞体积比周围白细胞大；②CTC细胞核经DAPI染色，比较明亮，细胞核较大，核浆所占比例较大，核分裂程度较大，且呈病理性核分裂；③经标志物荧光染色，胞浆抗CK19(+)与CD45(-),显示存在较为明显的细胞形态，且具有较为清楚的细胞界限；④细胞核面积与相应胞浆抗原染色部位面积接近。本研究中，将CK19(+)以及细胞数大于1个视为CTC阳性[5]。1.5统计学方法采用SPSS19.0软件对数据进行统计分析，计量资料以(x±s)表示，组间比较采用t检验；计数资料采用x2检验，P[4]刘俊，张素珍，杨牡丹，等•替吉奥联合胸腹腔注药治疗老年晚期胃
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