植物组织培养 第一章试题 2.doc

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1、第1章《实验室及基本操作》复习题及参考答案一、填空：I、纽•织培养实验室必要的设备有超净T作台、高压灭菌器、空调机、天平、显微镜、蒸镭水发生器、酸度计等。★2、培养基成分主要包括①无机营养成分、②有机营养成分)、③植物生长调节物质、④碳水化合物、⑤〕I它物质。3、培养基最常用的碳源是蔗糖,使用浓度在1%-5%常用_3_%o4、糖在植物组织培养屮是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养基渗透斥。5、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝I古I剂和支持物，一般用竜为6・10g/LZ间。6、驯化的甘的：衣于提高试管苗对外界环境条件的适应性，提高其光合作用的能

2、力，促使试健壮，提高苗的移裁成活率o★7、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发冇方向，其比值高：有利于根的形成和愈伤组织的形成;低：有利于芽的形成。8、培养基火菌一般在108kPa的压力下,锅内温度达121°C,维持20-30mino9、选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取适宜的大小。1()、诱导胚状体比诱导芽的优点：⑴数呈多、⑵速度快、(3)结构完整。II、试管苗的生态环境：高温且恒温、高湿、弱光、无菌。12、培养基中加入活性炭的日的：利用其吸附能力，减少…些侑害物质的影响。★13、筛选培养基的方法：单因了试验法、多因了试验法、光谱

3、实验法★14、植物培养技术：灭菌、接种、培养、驯化四个环节★15、试管苗的驯化注意：基质、温、光、水、月巴、气的综合管理二、名词解释：1、MS培养基(MSculturemedium)：它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。是H前应用报广泛的培养基。特点是无机盐离子浓度较高，有高含量的N、K,硝酸盐量大，营养丰富。★2、母液：是欲配制液的浓缩液。配成比所需浓度高10-100倍。母液配制时可分别配成大量元索、微量元索、铁盐、有机物和激索类等。好处：①保证备物质成分的准确性②配制时的快速移取③便于低温保藏。3＞褐变：是指外植体在培养屮体内的多酚氧化酶

4、被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醞类物质，有时使整个培养基变褐，从而抑制其他酶的活性，影响材料的培养。4^玻璃化现象(vitrificationphenomenon)：在长期的离体培养繁殖时，有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水渍状，这种现象称为玻璃化。5.消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物，使Z不再发生危害作用。6.灭菌：是指用物理或化学的方法，杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体，即把所有生命的物质全部杀死。7.接种：在无菌条件下，用灼烧过的银了将外植体放到培养基上的操作过稈。三、问答题K一般组织培养的操作工序：(1)、培养器皿的清洗;(1)、培养基的配制、

5、分装和高压灭菌;(2)、无菌操作——材料的表血灭菌和接种；(3)、将培养物放到培养室培养；(4)、试管苗的驯化、移栽和初期管理。★2、论述植物生长调节物质在组织培养中的作用？并列举常见的种类(1)生长素类：主要被用于诱导愈伤组织形成，促进细胞脱分化；促进细胞伸长；诱导根的分化，促进生根。如：IAA(眄呀乙酸)；NAA(蔡乙酸)；IBA(呵陈丁酸)；2,4—D(2,4—二氯苯氧乙酸)(2)细胞分裂素类：①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长。②促进细胞分裂与扩大。③抑制根的分化。抑制衰老，减少叶绿素分解，有保鲜效果。如：包括6-BA(6—节基腺嚓吟)、Kt(激动素)、Zt(玉米素)等。

6、★3、常用的培养基有哪些？说明其特点(1)MS培养基:1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。是目前应用最广泛的培养基。特点是无机盐离了浓度较高(2)white培养基：无机盐浓度较低，适于生根培养。⑶N6培养基：KNO3和(NH4)2SO4含量高，不含钳。广泛应用于禾谷类植物的花粉和花药培养。(4)B5培养基：主要特点是含有较低的钱盐，较高的硝酸盐和盐酸硫胺素。适宜双子叶植物特别是木本植物的培养★4、如何配制MS培养基？(1)配制母液：一般母液配成比所需浓度高1()・100倍的浓缩液，配制时可分别配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激索类等。(2)

7、配制方法：%1将母液按顺序摆放%1取适最的蒸憎水加入配制容器屮%1按需要星依次取母液及生长调节物质%1加入蔗糖(30g/L)溶解%1定容%1调pH值%1加琼脂(6・10g心，完全融化后，分装至培养瓶屮，封口%1高压灭菌★5、如何对外植体进行表面消毒？(1)将需要的材料用水洗干净。(2)表瓯灭菌：用70%酒精浸30-60s左右。(3)灭菌剂处理：0.1%升汞10分钟、或在2%次氯酸钠液中浸泡20・25分钟。(4)用无菌水冲洗3・5次左右6、接种后离体培养物对光、温、湿等环境条件的要求？(1)光照：愈伤组织