微生物限度测定所用培养基.doc

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1、微生物限度测定所用培养基微生物检测所涉及的原料药品:蛋白豚、牛肉浸出粉、氯化钠、琼脂、匍萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、玫塊红钠、酵母浸出粉、蒸镉水。或者成品营养琼脂、玫瑰红钠琼脂、酵母浸出粉月东匍萄糖琼脂。所涉及的物品:量筒、烧杯、培养皿、三角瓶、牛皮纸、橡胶塞、试管夹、隔热手套、滤纸、酒精灯、火柴、高温高压灭菌指示胶带、试管刷等。1、营养琼脂培养基1.1、用途:供药品和生物制品中细菌的计数和培养用。(《中华人民共和国药典》2010年版1.2、干粉配方(每升):【成分】蛋白豚20g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g、琼脂14.0g>蒸憎水10

2、00mL(《中华人民共和国药典》2010年版)【制备】将上述成分(除琼脂外)溶于水屮校正pH汗加入如琼脂,点沸溶解,根据用途不同进行分装,经12代灭W15min,最终pH7.0〜7.4。置冰箱保存,两周内保持用完。1.3、成品配方:称取本品Mg(不同厂家生产取的量不一样具体看使用说明),加入蒸催水或去离子水lOOOmL,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121°C高压灭菌15mino2、玫瑰红钠琼脂培养基2.1、用途:供药品和生物制品屮霉菌和酵母菌的计数、分离和培养用。(《中华人民共和国药典》2010年版)2.2、原理:豚提供碳源和氮源;

3、葡萄糖提供能源;磷酸二氢钾为缓冲剂;硫酸镁提供必须的微量元素;玫塊红钠作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长,并可减缓某些孫菌因生长过快而导致菌落漫延生长;琼脂是培养基的凝固剂。2.3、干粉配方(每升):【成分】腺5.0g葡萄糖10.0g>磷酸二氢钾l.Og,硫酸镁0.5g、玫瑰红钠0.0133g、琼脂14.0g.蒸懾水1000mL(《屮华人民共和国药典》2010年版)【制备】将上述成分除葡萄糖、玫塊红钠外,微温溶解,滤过,加入簡萄糖、玫瑰红钠根据用途不同进行分装,经115°C灭菌15min,最终pH6.0±0.2(药典没有标示)。置冰箱保存,两

4、周内保持用完。2.4、成品使用方法:称取本品30.5g(不同厂家生产取的量不一样具体看使用说明),加入熬憎水或去离子水1L,搅拌加热姦沸至完全溶解,分装三角瓶,121°C高压火菌20min.2.5、(1)计数:一般情况下,玫塊红钠平板计点霉菌或酵母菌数,如在该平板上生长的细菌菌落数多于营养琼脂平板上生长的菌落数时,则应同时点计细菌数,并将该菌数作为供试品的细菌数报告。固体供试品在玫魂红钠琼脂平板上点计霉菌落数,液体供试品则需在玫瑰红钠琼脂平板上点计霉菌与酵母菌菌数;含蜂蜜及干浆的合剂需以玫塊红钠平板的霉菌菌落数加上酵母膏粉豚匍萄糖琼脂平板的

5、酵母菌菌落数作为供试品的霉菌、酵母菌总数。3、酵母浸出粉陈葡萄糖琼脂培养基3.1、用途:供药品和生物制品中细菌的计数和培养用。(《中华人民共和国药典》2010年版3.2、干粉配方(每升):【成分】蛋白月东10g>酵母浸出粉5.0g、葡萄糖20g、琼脂14.0g、蒸镭水蒸徭水1000mL(《中华人民共和国药典》2010年版)【制备】将上述成分(除術萄糖外)混合溶于水,微温溶解,滤过,加入葡萄糖,根据用途不同进行分装,经115°C火菌15min,最终pH7.2〜7.4(药典没有标示)置冰箱保存,两周内保持用完。3.3、成品配方:称取木品Mg(不

6、同厂家生产取的量不一样具体看使用说明),加入蒸憎水或去离了水lOOOmL,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,121°C高压灭WJ15min.

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