资源描述：
《薄膜过滤反注培养基法检查抑菌药品微生物限度分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、薄膜过滤反注培养基法检查抑菌药品微生物限度分析张哲褚良(盘锦市盘品药品检验所124010}【摘要】目的：研究薄膜过滤反注培养基法在抑菌药品微生物限度检查过程，分析其方法实施的可行性。方法：采用活菌培养计数，倾注法回收率按100%计，比较反注法与贴膜法的差异。结果：金黄色葡萄球菌：反注法回收率为95.23%,贴膜法回收率为95.01%,两种方法差异无统计学意义(P>0.05);大肠杆菌回收率分别为95.66%和95.01%,两种方法差异无统计学意义(P>0.05);白色念珠菌回收率分别为91.95%和93.50%,两种方法差异无统计学意义(P>
2、0.05)。结论：对标准菌株培养计数回收率进行检验，发现反注法与贴膜法比较差异无统计学意义，但反注法能简化实验操作，减少操作污染，值得在实践检查过程中应用。【关键词】薄膜过滤反注培养基法贴膜法抑菌药品微生物限度检查【中图分类号】R446.5【文献标识码】B【文章编号】1672-5085(2014)03-0262-02微生物学检查方法包括微生物限度检查法和无蘭检查法。微生物限度检查法是检查非规定灭菌制剂及原辅料受微牛.物污染程度，包括细菌、霉菌等菌种的数目及控制菌检查。无菌检查法是检查药典要求的无菌药品、原辅料等是否无菌。薄膜过滤法,较多应用于含抑菌成分供试品微
3、生物限度检查，但实际工作中很容易被污染，木研宄设计了一种薄膜过滤计数培养器，完成过滤冲洗后,不取出滤膜,直接在滤膜背面注入培养基培养计数，被称为薄膜过滤反注培养基法。为了检验该方法应用效果，并与贴膜法进行了比较。现报告如下。1材料1.1试验材料薄膜过滤计数培养器(自制)，薄膜过滤器100mL,两者滤膜直径和孔径分别均为50mm和0.45μm(杭州高得医疗器械有限公司)；白色念珠菌(CMCC(F)98001)、金黄色葡萄球菌(CMCC(B)26003)、大肠杆菌(CMCC(B)44103)。1.2薄膜过滤计数培养器结构培养器外体为透明材料组成，培养器经环氧
4、乙烷火菌包装。1.3薄膜过滤计数培养器工作原理，参考相关文献[1]1.4统计学方法数据使用SPSS17.0进行统计，组间资料用t检验，计数资料用χ2检验，计量单位用(x±s)表示，以P<0.05为差异有统计学意义。2方法与结果2.1对照菌液的制备金黄色葡萄球菌菌液以及大肠杆菌菌液：取金黄色葡萄球菌(大肠杆菌)的营养琼脂培养基培养物，接种于营养肉汤培养基中/温度在30〜35,培养19h,用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至含菌50〜100个/ml;白色念珠菌菌液：取白色念珠菌的真菌琼脂培养基培养物，接种于真菌培养基中，温度在20〜25，培养24h
5、,用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至含菌50〜100个/ml。2.2薄膜过滤反注培养基法培养计数效果试验薄膜过滤反注培养基法:取对照菌液l.OmL,加入100mL0.9%无菌Nacl溶液中，减压抽滤，使用0.9%无菌Nacl溶液冲洗4次，每次150mL,然后反注培养基。贴膜法:取对照菌液l.OmL,加入100mL0.9%无菌Nacl溶液中，减压抽滤，使用0.9%无菌Nacl溶液冲洗4次，每次150mLo菌面向上，直接贴在平皿内(己浇注培养基)。倾注法:在平皿内先加入对照菌液l.OmL,再倾注培养基。金黄色葡萄球菌、大肠杆菌用营养琼脂培养基，在温度30〜35条件下培
6、养48h计数，白色念珠菌用真菌琼脂培养基在温度20〜25条件下培养72h计数。每次试验重复5次，并做平行试验3个。金黄色葡萄球菌:反注法冋收率为95.23%,贴膜法回收率为95.01%,两种方法差异无统计学意义(P>0.05)；人肠杆菌冋收率分别为95.66%和95.01%，两种方法差异无统计学意义(P>0.05);白色念珠菌冋收率分别为91.95%和93.50%,两种方法差异无统计学意义(P>0.05)o见表1。表1不同菌株两种方法冋收率比较2.3实际样品检查按照中国药典微生物限度检查法[2],使用薄膜过滤反注培养基法、贴膜法，分别对3种制
7、剂进行检査，每批样品取原液及稀释10倍的原液，各取培养器4只，注入供试液，加入0.9%无菌Nacl溶液50ml，过滤，以0.9%无菌Nacl溶液冲洗4次，每次150mU2套培养器进行细菌培养，其余2套培养器进行真菌培养。贴膜法同上述处理。见表2。表2两种方法实际样品检查结果3.讨论薄膜过滤法在药品检验过程中，主要被用来避免药物中抗菌作用。薄膜过滤法最大程度地降低了外界因素和主观因素的影响[3L而且取样量大，因此，该方法更为客观、公正，具有很高的说服力。该法的用途十分广泛，欧洲、美国、英国、日本的药典均有收载。在药品检验技术上与国际接轨，对提高药品质量以及保障人
8、民健康，有着十分重要的意义。本研究采用
