α-酮酸的合成方法及应用研究

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1、堵国成，等：Ol一酮酸的合成方法及应用研究亲和性也各不相同，甚至来源于同一菌株的不同基同。可能信号肽与酶的折叠相关，如果单纯去除信因编码的酶也会表现出不同的底物特异性．如号肽，酶无法正确折叠，进而无法获得有活性的Proteusmirabilis来源的PM1只能催化几种氨基酸，LAD。而Proteusmirabilis来源的PMA可以催化大多数的氨基酸。膜联LAD由于在催化过程中不产生过氧化氢，消除来了过氧化氢对细菌的毒害作用，扩展了一酮酸作为氨基酸脱氨基的产物，在化学、医异源表达的宿主范围。来源于Protesmirabilis的药、食品、化妆品领域有着大量的需求，而以

2、氨基酸pml已经成功在E．coliBL21(DE3)表达．确定了其为原料，将低成本的氨基酸转化成相应高附加值的对组氨酸、谷氨酸、精氨酸和苯丙氨酸的催化效率酮酸，可以获得较高的经济效益。目前酮酸的生物较高『删。来源于Proteusmyxofaciens的LAAD在E．合成方法中，代谢工程改造菌种生产一酮酸有着广coliK12中也成功表达，通过全细胞转化确定这个阔的前景，目前发酵法生产酮酸的产量较低，可以酶主要对脂肪族、芳香族和含硫侧链的氨基酸催化通过进一步的代谢改造提高酮酸产量。虽然具有将效率较高。并且通过初步纯化表明此酶表达在细胞氨基酸转化成酮酸能力的酶种类繁多，但是

3、微生物膜上。膜上表达的LAD通常在N端有信号肽序列，转化法目前研究较少，可以依赖膜联LAD进一步提通过前导肽定位在细胞膜上。Gazi等人[9]试图将高酶的底物特异性和酶活，或者采用固定化的方法Proteusmirabilis来源的膜联LAD变成游离表达，将实现工业化大规模生产。而且膜上表达的LAD目前N端的21～87个核苷酸去除，结果过量表达的酶为仅仅在大肠杆菌中异源表达，可以通过利用不同细包涵体形式，通过复性和纯化后．酶量为最初的胞膜结构的宿主菌，使得酶活进一步提高，早El实40％，测定的动力学参数与膜上表达的LAD基本相现一酮酸的生物法大规模生产参考文献：【1]A

4、paricioM，BellizziV，ChauveauP，eta1．Protein—restricteddietsplusketo／aminoacids-avalidtherapeuticapproachforchronickidneydiseasepatients[J]．JournalofRenalNutrition，2012，22(2)：S1一$21．『2】MouS，LiJ，YuZ，eta1．Ketoacid—supplementedfow-proteindietfortreatmentofadultpatientswithhepatitisBvirusinfec

5、tionandchronicglomerulonephritis[J]．JournalofInternationalMedicalResearch，2013，4l(I)：129—137．[3]NianH，BissonWH，DashwoodW—M，eta1．c~-Ketoacidmetabolitesoforganoseleniumcompoundsinhibithistonedeaeetylaseactivityinhumancoloncancercells[J]．Carcinogenesis，2009，30(8)：1416—1423．f4]VanSomerenKA，

6、EdwardsAJ，HowatsonG．supplementati0nwithbeta—hydroxy—beta—methylbutyrate(HMB)andalpha—ketoisoeaproicacid(KIC)reducessignsandsymptomsofexercise—inducedmuscledamageinman[J]．InternationalJournalofSportNutrition&ExerciseMetabolism，2005，15(4)：413-424．[5]EscobarJ，FrankJW，SuryawanA，eta1．Leueine

7、andct-ketoisoeaproicacid，butnotnorleucine，stimulateskeletalmuscleproteinsynthesisinneonatalpigs[J]．TheJournalofNutrition，2010，140(8)：1418—1424．[61FlakollP，VandehaarM，KuhlmanG，eta1．Influenceofalpha—ketoisoeaproateonlambgrowth，feedconversion，andcarcasscomposition[J]．JournalofAnim