盐度对天津厚蟹不同器官组织中Na^＋／K^＋-ATP酶活力的影响-论文.pdf

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1、第33卷第8期水产科学Vo1．33NO．82014年8月FISHERIESSCIENCEAug．2014盐度对天津厚蟹不同器官组织中Na+／K+-ATP酶活力的影响徐敬明(重庆文理学院林学与生命科学学院，重庆402168)摘要：在2O℃下研究了盐度0、10、20、30、40和5O对天津厚蟹鳃、肝胰脏及肌肉Na／K一ATP酶活力的影响。试验结果表明，天津厚蟹鳃中Na／K十_ATP酶的活力为最高，其次为肝胰脏，肌肉最低，其间显著差异(P

2、P酶的活力略高于3O盐度组，彼此间差异不显著(P>O．05)；其他各组3h后(20盐度3h时除外)，鳃Na／Z一ATP酶的活力与试验开始时相比显著升高(PO．05)。关键词：天津厚蟹；盐度；鳃；肝胰脏；肌肉；Na／Z一ATP酶中圈分类号：$965．28文献标识码：A文章编号：1003一llll(2Ol4)0

3、8-0483—05天津厚蟹(Helicetientsinensis)属方蟹科、相手与粪便。蟹亚科，广布于东海、黄海和渤海潮间带河口[；当1．2方法前，归属于弓蟹科、圆方蟹亚科引。1．2．1盐度梯度的设定和取样Quinn等[3]首次报道了圆轴蟹(Cardiosoma试验设0、10、20、30、40、5O共6个盐度梯度，高、guanhumi)鳃上皮细胞存在Na／K+-ATP酶，开低盐度的试验液为自然海水(盐度为30)中加NaC1始了对蟹类Na／Z-ATP酶活性及渗透压调节的和充分曝气的自来水配制而成。试验于500mm×诸多研究。。而关于天津厚蟹Na／Z一ATP酶400mm×300mm

4、容水10L的玻璃缸中进行，每缸活性的研究却未见报道，笔者研究了不同盐度的水直接(未驯化)放入健壮的天津厚蟹16尾，每个梯环境对天津厚蟹Na／K+_ATP酶活性的影响，为度3个平行组，盐度(30)为对照组，常规管理。于进一步了解河口广盐性蟹类的渗透压调节机理提oh、3h、6h、12h、1d、3d、5d、7d、9d随机从每个供基础资料。重复中取1尾天津厚蟹，去掉头胸甲，取两侧鳃丝(蒸馏水洗净、滤纸吸干)、肝胰脏和肌肉置于1材料与方法1．5mL离心管中，保存于一80℃冰箱中待测。1．1材料1．2．2Na／Z-ATP酶活性的测定试验用天津厚蟹于2006年9月12日采自威海将鳃丝、肝胰脏和

5、肌肉置于预冷的6mL匀浆荣成沿海潮上带泥岸，体质量(湿质量)为8．28～液(250mmol／L蔗糖，6mmol／LEDTA—Na2，1021．9(13．36±3．78)g，甲长29．3O～19．6O(24．65mmol／LTris，0．1脱氧胆酸钠，pH7．5)中，用组土2．32)mm，甲宽33．6O～24．20(28．314-2．19)织匀浆机18000r／min冰浴匀浆3min。匀浆混合mm。选取体质量(16．00±3．00)g的个体在盐度物2℃，l1000r／min离心30min，取上清液再离心3O、温度(20±1)℃的海水中暂养24h后用于试验；(2℃，10000r／mi

6、n)10min。再取上清液保存于4暂养时，连续充气，日换水1／3，每2d适当投喂菲律℃，在8h内测定Na／Z十_ATP酶活力。宾蛤仔(Ruditapesphilippinarum)，并及时清除残饵Na／K+。ATP酶活力采用超微量Na／K+_收稿日期：2013—10—28；修回日期：2014—01—16．基金项目：重庆文理学院引进人才专项(200803)．作者简介：徐敬明(I963一)，男，教授，博士；研究方向：动物分子与生理生态．E—mail：xjingming@163．tom．水产科学第33卷ATP酶测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)测度关系密切(图1)。在9d的试验中，对

7、照组(30)定。通过测定在有酶液和无酶液情况下，ATP经水以及40、5O盐度组的天津厚蟹鳃Na／K+-ATP酶解释放出的无机磷量的差值来计算Na／K+_ATP活力一直较稳定，只是40、5O盐度组的Na／K十。酶活力，酶活力单位为umol／mg·h。采用考马斯ATP酶的活力略高于3O盐度组，但其问差异不显亮蓝法测定酶蛋白含量[1。著(P>0．05)；而其他各盐度组在盐度作用3h后1．3数据处理与分析(20盐度3h时除外)，鳃Na／K+_ATP酶活力与一_(L{．∞E一．Io暑．。．