微卫星分子标记鉴别羊肉真伪方法的建立及应用-论文.pdf

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1、山东农业科学2014，46(6)：16～18ShandongAgriculturalSciences微卫星分子标记鉴别羊肉真伪方法的建立及应用王可，张玉玉，崔绪奎，高淑霞，黄保华(山东省农业科学院畜牧兽医研究所／山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室，山东济南250100)摘要：根据动物种间特异性的原则，筛选出1对微卫星引物，建立了一种鉴别羊肉真伪的PCR检测技术。应用该方法，检测不同品种的羊肉样本(山羊、绵羊、杂交羊等)均能特异扩增出220—247bp的目的片段，而猪、牛、鸡、鸭、兔等动物样本均呈阴性。该

2、方法对羊肉的检测敏感度达10。。应用该方法对山东省内屠宰场生产线、超市、市场中的各种畜禽鲜肉样品进行鉴定，羊肉的检出率为100％。关键词：羊肉；真伪；微卫星标记；鉴别中图分类号：Q一331文献标识号：A文章编号：1001-4942(2014)06-0016—03EstablishmentandApplicationofMethodsforAuthenticityIdentificationofMuttonwithMicrosatelliteMolecularMarkers‘WangKe，ZhangYuy

3、u，CuiXukui，GaoShuxia，HuangBaohua(InstituteofAnimalScienceandVeterinaryMedicine，ShandongAcademyofAgriculturalSciences／ShandongProvincialKeyLaboratoryofDiseaseControlandAnimalBreeding，finan250100，China)AbstractApairofspecificmicrosatellitemolecularmarkersw

4、asscreenedaccordingtotheruleofspe—ciesspecificitytoestablishaPCRmethodforidentifyingmuttonauthenticity．Withthismethod，220—247bptargetfragmentcouldbeamplifiedfrom11sheeporgoatbreeds，whilenothingcouldbeamplifiedfrompigs，cattle，chickens，ducksandrabbits．Thed

5、etectingsensitivityofthismethodcouldreach10-10．Withthismethodtoidentifycarcassmeatsoflivestockandpoultryfromslaughteringfactories，supermarketsandped—lars’markets，thedetectableratewas100％．KeywordsMutton；Authenticity；Microsatellitemolecularmarker；Identific

6、ation随着羊肉价格的上涨，国内市场上出现了大有更高的种间多态性，因此利用PCR特异扩增的量以鸭肉、鸡肉等低价肉甚至是一些病死猪肉添方法检测肉类成分是切实可行的。PCR法操作加色素、羊油或羊肉精加工成假羊肉的现象，严重简便、特异性强、灵敏度高，在实际中应用较为广损害了消费者的利益和健康，扰乱了市场秩序。泛～。消费者对于羊肉等食品安全的关注已成为全社会目前，用于肉类食品成分鉴定的基因通常位的焦点。面对目前羊肉市场存在的乱象，根据肉于线粒体(mtDNA)上，包括细胞色素b(Cb)、的色泽、气味、纹理、肥瘦

7、等方面进行的传统鉴别12SrDNA、16SrDNA、D—loop基因等“J。而微方法已不能满足科学监管的需要。卫星标记具有严格的种属特异性，且因数量多、分肉制品的鉴别可通过以蛋白质为基础的分析布广、多态性丰富、呈共显性遗传方式以及检测快方法和以DNA为基础的检测方法实现。蛋白质速方便等优点备受推崇J。微卫星PCR扩增所易受肉的加工处理、新鲜程度、动物年龄等因素的需样本量极少，并且由于微卫星序列较短，即使降影响J，而DNA相对比较稳定，且比蛋白质具解的DNA也可能包含足够用来扩增的微卫星序收稿日期：201

8、4—02—17基金项目：山东省现代农业产业技术体系羊产业创新团队(SDAIT一09一Oll—O2)资助。作者简介：王可(1971一)，女，研究员，博士，研究方向为羊分子育种。E—mail：sduwangke@163．corn通讯作者：黄保华(1964一)，男，研究员。E—mail：jn—hbh@163．tom