酶放大免疫检测技术在监测他克莫司血药浓度中的应用-论文.pdf

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1、中国免疫学杂志2014年第3O卷doi：10．3969／j．issn．1000-484X．2014．09．036酶放大免疫检测技术在监测他克莫司血药浓度中的应用卢蕾杨欣(贵州省贵阳市第一人民医院药剂科，贵阳550002)中图分类号R917文献标志码A文章编号looo-4s4x(2014)09-12944)4治疗药物监测(Therapeuticdrugmonitoring，年开发出对霉酚酸的检测试剂。EMIT也被定为TDM)是治疗医学领域内出现的一门边缘学科，其Syva公司测定血清药物浓度试剂盒的注册名称。目的

2、是通过测定血液或其他体液及组织器官中药物1．2EMIT的检测原理EMIT的原理是抗体结合的浓度，合理地设计给药途径、次数和剂量，促使给位点竞争性抑制，受检品中的药物和试剂中的用葡药方案个体化。萄糖．磷酸脱氢酶(G6PDH)标记的药物竞争定量大环内酯类免疫抑制剂他克莫司(Tacrolimus，的抗体结合位点。酶标记的药物在与抗体结合后将FK506)是第2代免疫抑制剂的代表性药物，体外免导致活性丧失，存留下来的具有活性的酶将抗体试疫抑制作用为环孢菌素A的50—100倍，广泛用于剂A中的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD

3、)转化成它器官移植术后抗排异反应及自身免疫性疾病的治的还原态(NADH)，从而引起吸光度的改变，可以被疗，具有药效强、使用剂量低、排斥反应低等优点。检测分析系统所检测，因此酶浓度的变化反映了测他克莫司治疗窗狭窄，毒副作用与血药浓度紧密相定样本中药物的浓度_5]。均存在明显个体差异耄2EMIT监测FK506血药浓度，因此用药时需加以血药浓度一一、一监测。近年来，基于不同原理，对FK506血药浓度2．1FK506药代动力学特点及影响因素FK506监测已发展了多种的监测方法及分析仪¨J，主要的人体内药代动力学过程较

4、为清楚，其口服首过效技术包括酶联免疫吸附法、微粒酶免疫分析法、高效应明显，主要在空肠和回肠吸收，平均口服生物利用液相色谱法、高效液相串联质谱检测和酶放大免疫度差别很大(4％～89％)；FK506在肝脏和小肠代检测等。在查阅大量文献的基础上，本文对谢，血浆半衰期约40h，系统应用主要通过肝脏中细FKS06血药浓度监测方法中常见的酶放大免疫检测胞色素P450(CYP3A)代谢，吸收受CYP3A4、技术(Enzymemultipliedimmunoassaytechnique，CYP3A5和多药耐药基因1(MDR1

5、)的编码产物PEMIT)进行综述和讨论。糖蛋白(P—gP)调节，主要代谢产物为13一氧去甲基1酶放大免疫检测⋯，1．1酶免疫技术与EMIT酶免疫技术是利用抗原表皮，0．5％～1％在真皮层，1％一4％透皮进入抗体反应的特异性与酶催化底物反应的高效性、专血液。一性相结合，以酶标记的抗体(抗原)作为主要试剂FK506的代谢存在明显个体差异，且影响因素进行检测，包括酶放大免疫检测技术(EMIT)、基众多，服用固定剂量的肾／肝移植患者的血药浓度．质荧光标记酶分析(SFLA)、克隆酶供体免疫分析时间下曲线面积(AUC)差

6、别达8倍之多，同一个体(CEDIA)等，其主要区别见表1。不同时间的AUC的差值可达25％～40％[6,71。根其中，EMIT又称酶增强免疫检测技术，1972年据已有的报道，FK506药代动力学影响因素包括①由Rubenstein首先提出，此后该技术被Syva研发应基因多态性j：基因多态性所导致的药物体内过程用于药物浓度监测。1974年该公司应用EMIT首先差异是引起个体药物疗效和不良反应不同的最主要开发出药物浓度监测项目——苯妥英浓度监测，在因素之一，CYP3A4、CYP3A5及P．gP基因表现出高1990

7、年开发出免疫抑制剂环孢素的检测试剂，1996度多态性，对FK506药动学及药效学影响明显。②合并用药：结合药品说明书，抑制细胞色素作者简介：卢蕾(1975年一)，女，副主任药师，主要从事药学方面P4503A的药物，如可的松、麦角胺、炔雌醇、甲地研究孕酮、依他康唑、大环内酯类(交沙霉素)、利多卡因、9表1常见酶免疫技术Tab．1Generalenzymeimmunoassaytechnique咪康唑，咪唑安定、钙离子拮抗剂(地平类)、奎尼18B基因突变提高CYP3A4酶活性，使底物FK506丁、他莫昔芬、维拉帕

8、米等可能抑制FK506代谢，从代谢加速，清除率升高，因此CYP3A5AA型或AG而升高FKS06血药浓度。③其他：包括年龄、性别、型且CYP3A418B基因突变者需适当增加FKS06体质量、身高、服药时间、患者肝肾功能等均对药量，才可能达到有效的血浓。Vannaprasaht14]和FK506血浓有影响，如晨起服药的药浓较高；此外，Li等¨采用EMIT法检测也有类似报道。FK506由于约95％的FK