资源描述：
《半夏外植体组织培养的研究.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、半夏外植体组织培养的研究摘要：半夏(Pineilia/6?rntzr^(Thunb)Breit.)是天南星科半夏属的多年生草本药用植物，其块茎为传统的小药材。获取半夏的传统方法是以采集野生植物资源为代价，野生资源急剧减少，组织培养技术成为解决这一问题的关键工。利用外植体进行组织培养则是很重耍的一个方而，H前就半夏组织培养体系的建立和技术规程都有深入研究。关键词：半夏；组织培养；外植体1半夏概况半夏作为药用，在我国已有二千多年的历史⑵，据统计，在558种屮药处方小，半夏的使用频率居第22位⑶。现代医学研究发现，半夏不
2、仅可以用于燥湿化痰，降逆止呕，消脾散结，外用消肿止痛等症状，而且在解毒、缓解心绞痛、改善心电图、治疗室上性心动过速、肿瘤、子宫颈糜烂等病状具有良好的疗效⑷，十年来对半夏的研究口趋热化，研究的方向主要集小在其栽培⑸、组织培养⑹、有效成分⑺、纱理作用⑻、分子杂交［9］、植物保护［0。因其巨大的经济效益，人们长期过度采挖，半夏野生资源已近枯竭，远不能满足市场需求，现已进行人工种植。而最主要的种植方式则是组织培养。2半夏组织培养的研究进展2.1外植体选择及处理外植体即植物组织培养所用的材料。有研究人员认为叶柄是诱导胚状体和
3、愈伤组织的最佳外植体［，1-，2Jo其消毒灭菌方法需选择对外植体细胞损伤较小、细胞生长容易恢复和消毒彻底的方法。一般采用0.1%氯化汞消毒10min,无菌水冲洗4、5次，用无菌滤纸吸干水分，接种到培养基上⑴。灭菌吋间较短，消毒剂对外植体细胞的损伤小，外植体易于恢复生长。外植休大小对实验成功也起着非常重要作用，外植体太大导致消毒不彻底，外植体太小细胞容易受损伤，难以恢复生长。一般取3-4cm左右大小，剪去老叶，进行消毒，消毒完毕后，切出被HgCH损伤的细胞,再将外植体切成合适的大小，用无菌水冲洗去伤口分泌物再进行接种
4、，效果较好ll3-,5Jo有学者用珠芽作为外植体，优选出半夏快速繁殖的分化培养基，成功分生出了大量的半夏试管苗[⑹。也有科研人员以半夏茎尖为外植体的组织培养技术有较深入研究2.2培养条件及培养基半夏组织培养以MS培养基为基本培养基〔冈,也有人使用B5型〔⑼（其屮pH值5.5）o其体培养基的琼脂浓度0.6%・0.7%,培养基硬度大不利于半夏外植体生长，营养物质扩散慢；蔗糖浓度3%,蔗糖对愈伤的形成本质部及韧皮部的分化十分必要；pH值5.8-6.0,半夏喜酸，超过6.0将影响半夏的愈伤形成、增殖、生长、出芽和生根。培养
5、温度22-28°C,以25°C左右居多，温度过高导致细胞停止生长，湿度70%-80%,光照强度1500lx左右,日光灯和白炽灯均可，光照吋间I2h或全黑喑培养〔绚。一般来说，诱导愈伤组织,室内散光下效果较好，而在出苗和生根期间，持续光照有利于出芽和生根lI]o附加激素有生长素NAA、2,4-D和IAA,细胞分裂素6-BA和KT,赤霉素GA（GA3）以及TDZ（苯基曝二卩坐t詐_►胎Tino解一>pH值融分破嗚器血一►洗诙—►干慎►質接种〜）01冷却1mm<—就如B）[21o培养基配制程序如下：3半夏组织培养体系建立
6、及技术规程培养体系建立方面：研究发现，以块茎为外植体，应用激素配比为MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.0mg/L的培养基，可实现一次成苗的F1标。因此，不定芽型途径（半夏不定芽诱导与植株再生）缩短培养吋间，节约成本，简化试验程序，是工厂化生产半夏试管苗的首选途径。建立半夏快速繁殖体系，可大量提供优质半夏组培苗，同时对半夏的品种遗传改良、细胞代谢产物的高效生产具有一定的指导意义⑶。技术规程方面：试管苗的增殖培养如图
7、[，8JoI
8、»二《1~~I参考文献：m孙健玲.半夏的快繁及诱导子对其愈伤组织总生物碱枳累的影响
9、[D].安徽：安徽农业犬学，2010⑵邱萍.半夏脱毒培养技术[D].四川：西南大学，2007[3]陶米林.半夏组织培养体系的建立[J].北方园艺，2013(04)：113〜117[4]刘良清.半夏人工种茎的组织培养优化与栽培及半夏子芽发生研究[D].湖北：华屮农业大学植物科学技术学院，2011⑸马开森，丁季春，钟国跃，张明.不同來源地的半夏种源对比栽培试验[J].中国中药志，2004,29(2):184-185[6]罗成科，彭正松，陈卫民.三叶半夏悬浮培养下的体细胞胚胎发生及植株再生[J].西北植物学报，2006,
10、26(4):842-846[7]Mei-huaHan,Xiu-weiYang,MingZhang,Guo-yucZhong.PhytochcmicalStudyoftheRhizomeofPinelliaternataandQuantificationofPhenylpropanoidsinCominercialPineiliaTuberbyRP-LC.Ch
