大豆MYB转录因子GmPHR1转化及功能研究-论文.pdf

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1、第32卷第3期大豆科学Vn1.32No.32013证6月SOYBEANSCIENCEJun.2013大豆MYB转录因子GmPHR1转化及功能研究吴冰,李喜焕,刘翠,王运杰,李文龙,常文锁,张彩英(河北农业大学/教育部华北作物种质资源研究与利用重点实验室,河北保定071001)摘要:在克隆获得MYB转录因子GmPHR1基础上,构建基因超表达载体,采用农杆菌介导子叶节转化技术将其转入冀豆12,获得GmPHR1高效表达转基因新材料,并分析基因在耐低磷和低磷敏感品种中的表达差异。结果表明:成功构建了目的基因超表达载体

2、pBI121一GmPHR1,获得了经PCR验证为阳性的rd转基因新材料;荧光实时定量PCR检测发现,其中4个株系的GmPHR1表达量达到野生型对照的2倍以上,说明GmPHR1能够在转基因新材料中高效表达;进一步分析低磷胁迫下不同耐低磷特性品种的基因表达量,发现GmPHR1在耐低磷品种中呈现快速诱导、持续表达与高表达量的模式,而在低磷敏感品种中则表现缓慢诱导、迅速下降和低表达量的模式。关键词:大豆;MYB转录因子;载体构建;农杆菌转化;高效表达中图分类号:$565.1文献标识码:A文章编号:1000.9841(

3、2013)03-0302434GeneticTransformationandFunctionAnalysisofTranscriptionFactorGmPHR1inSoybeanWUBing,LIXi—huan,LIUCui,WANGYun-jie,LIWen—long,CHANGWen—SUO,ZHANGCai-ying(NorthChinaKeyLaboratoryofCropGermplasmResources,EducationMinistryofChina/AgricuhuralUniversi

4、tyofHebei,Baoding071001,China)Abstract:TodevelopnewtransgenicsoybeanmaterialswithMYBtranscriptionfactorGmPHR1,andtostudytheexpressionpatternsofGmPHR1indifferentlow—Ptolerantsoybeanvarieties,aover-expressionvectorpBI121一GmPHR1wasconstructedandintroducedintoJ

5、idou12byAgrobacterium.mediatedcotyledonarv—nodetransformationmethod.PCRandreal—timequantita.tivePCRanalysisresultsofthetransformedLplantsshowedthattheGmP1wassuccessfullyincorporatedintothesoybeangenomeandexpressedatahigherlevelthanthewild—type.Expressionpat

6、ternsassayedbyreal-timequantitativePCRrevealedthattheexpressionlevelofGmlinlow.PtolerantvarietyNF37wasinducedquicklyforalongerperiodatahigherlevelthanthatinsensitivevarietyNiumaohuangunderphosphatestarvationcondition.Keywords:Soybean;MYBtranscriptionfactor;

7、Vectorconstruction;Agrobacterium—mediatedtransformation;Highlyexpressed大豆是蛋白质、油脂及多种保健活性物质重要高效利用作物新品种就成为解决上述问题的最新来源,具有广阔的市场。自1994年抗除草剂转基因途径。大豆推广以来,美国、巴西、阿根廷等国的大豆市场有学者在研究拟南芥和水稻等模式植物时指占国际份额不断扩大,而我国大豆种植面积逐年递出,基因转录激活或抑制作用是植物应对环境逆境减,市场竞争力下降,面临国际市场廉价大豆产品胁迫的重要步骤。转录

8、因子作为基因表达的总调大量进口的压力与挑战,严重影响了大豆产业发展控者,在植物生长发育和应对生物及非生物胁迫过的掌控权⋯。因此,大力发展我国具有自主知识产程中有重要作用。因此,人们提出了采用转录权的转基因大豆迫在眉睫。因子基因改良植物耐逆性的全新途径。吴忠长磷素作为植物生长发育必需营养元素之一,既等通过克隆与转化bHLH类型转录因子.是植物体内许多重要有机化合物的组分,同时又以P1,在低磷条件下使得

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