《艾塞那肽对高糖及低糖环境下大鼠胰岛β细胞氧化应激及凋亡的影响》.pdf

《《艾塞那肽对高糖及低糖环境下大鼠胰岛β细胞氧化应激及凋亡的影响》.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第37卷2期宁夏医科大学学报2015年2月JournalofNingxiaMedicalUniversity·129·文章编号：1674—6309(2015)02—0129—04．诊．，U荽．—}爿艾塞那肽对高糖及低糖环境下大鼠胰岛p细胞氧化应激及凋亡的影响董幼平’。陈凌，李国徽(1．宁夏医科大学总医院内分泌科，银川750004；2．银川市中医院，银川750001)摘要：目的观察艾塞那肽对高糖及低糖条件下氧化应激的干预情况及其在降低胰岛13细胞凋亡中的作用。方法体外培养大鼠胰腺13细胞株INS一1细胞，分为正常对照组(NC)、高糖组(HG)、

2、低糖组DG和干预组即艾塞那肽高糖干预组(HE)、艾塞那肽低糖干预组(DE)、二甲双胍高糖干预组(HS)。相差显微镜观察细胞生长状态；流式细胞仪双染法及原位TUNEL法检测INS一1细胞凋亡情况；检测培养液中胰岛素(INS)、8一异前列腺素F2(8一iso—PGF2ot)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果细胞凋亡指数及凋亡率HG、DG、HE、DE和HS组均高于NC组(P均<0．O1或<0．05)，HE组低于HG组(P均<0．05)，DE组细胞凋亡指数低于DG组(P<0．05)。HG、DG、HE和DE组MDA及8一iso—PG

3、F2ot水平均高于NC组，SOD和INS水平低于NC组(P均<0．01或<0．05)；HE组MDA、8一iso—Pc水平低于HG组(P<0．05)，SOD、INS水平高于HG组(P<0．05)；DE组MDA、8一iso—PGF2水平低于DG组(P<0．05)，SOD水平高于DG组(P<0．05)；HE组INS水平高于DE组(P<0．05)。HS组INS水平低于HE组、MDA水平高于HE组(P<0．05)。结论艾塞那肽通过抑制包括高糖及低糖条件下所诱导的氧化应激水平，从而在一定程度上保护13细胞，减少细胞凋亡，有助于维持及提高13细胞数量。关键

4、词：艾塞那肽；胰岛B细胞；氧化应激；细胞凋亡中图分类号：R587文献标识码：A糖尿病是一种困扰全球的慢性疾病，目前无1材料与方法法治愈，其病因与胰岛B细胞数量绝对或相对减1．1主要药物及试剂少密切相关，细胞凋亡是导致上述现象的主要机RPMI1640培养基、胎牛血清、0．25％胰酶制之一。研究表明胰高血糖素样肽一1(glueagon(含EDTA)均购自GibcoBRL公司。大鼠胰腺B—likepeptide一1，GLP一1)类似物艾塞那肽(ex—细胞株INS一1细胞、大鼠8一异前列腺素检测试enatide)具有胰岛p细胞保护作用，并可抑制B剂盒

5、、丙二醛检测试剂盒(Beyotime公司)及超氧细胞凋亡的作用¨，有助于维持B细胞数量J，化物歧化酶活力分析试剂盒(BioVision公司)均延缓疾病的发展，但目前这一作用的机制尚不购自北京辉奥生物技术有限公司。AnnexinV—明确。研究证实糖尿病血糖不稳定时，即高糖或FITC／PI凋亡检测试剂盒购白银川昕泰昌盛生物低糖内环境下，体内氧化应激水平明显增高，这是有限公司。胰岛素检测试剂盒、TUNEL原位凋亡导致13细胞凋亡的主要原因之一。本研究采检测试剂盒购自北京嘉美生物技术有限公司。艾用体外培养大鼠胰腺B细胞系INS一1细胞的方塞那肽百时美

6、施贵药有限公司生产(批号法，人为改变细胞培养液葡萄糖浓度，模拟糖尿病C088173)。病理生理过程，观察INS一1细胞在不同血糖条件1．2细胞培养及分组下氧化应激情况，了解艾塞那肽干预后氧化应激大鼠胰腺B细胞株INS一1细胞为研究对象，指标及INS一1细胞凋亡的变化，探讨艾塞那肽保细胞复苏后培养于37．℃、5％CO培养箱中，培养护B细胞功能、抑制其凋亡的具体机制。液为含20％胎牛血清的RPMI培养基(含10％FBS，50~mol·Lp一巯基乙醇)，每2d换液一次，6—7d传代一次，80％汇合时消化。每孔5X收稿日期：2014—04—09基金项

7、目：宁夏自然科学基金(NZ1240)1O个·mL细胞接种于6孔板，培养48h后分作者简介：董幼平，主任医师；研究方向：糖尿病病因相关机制组。分为正常对照组(NC组，培养液葡萄糖浓度研究。为5．5mmol·L。’)、高糖组(HG组，培养液葡萄·130·宁夏医科大学学报37卷糖浓度为25retool·L)、低糖组(DG组，培养液采用单因素方差分析，各组间两两比较采用Dun．葡萄糖浓度为2．5mlTlO]·L)、高糖艾塞那肽干nett检验，尸≤0．05为差异有统计学意义。预组(HE组，葡萄糖浓度同HG组，艾塞那肽浓度2结果lOOnmol·L)、低糖

8、艾塞那肽干预组(DE组，葡2．1光镜下细胞形态学观察萄糖浓度同DG组，艾塞那肽lOOnmol·L一)、二倒置相差显微镜下观察INS一1细胞，细胞形甲双胍对照组(HS