胎次、日粮及环境温湿指数对奶牛hsp70表达的影响

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1、·8·卞圈哪斗·2010·8·科技胎次、日粮及环境温湿指数对奶牛HSP70表达的影响郭同军，王加启，卜登攀，王建乎，霍小凯-，李旦，，魏宏阳，周凌云(1．中国农业科学研究院北京畜牧研究所动物营养学国家重点实验室，北京100193；2．新疆畜牧科学院饲料研究所，乌鲁木齐830000)中图分类号：$823文献标识码：A文章编号：1004—4264(2010)08—0008—04摘要：本文主要研究初产和经产、不同比例的过瘤胃淀粉和脂肪日粮及环境温湿指数对热应激奶牛HSP70表达的影响试验选用54头中国荷斯坦奶牛．根据产奶量、泌乳天数和胎次相近原则，进行随机区

2、组试验设计。试验奶牛分3个处理组(高过瘤胃淀粉低饱和脂肪酸组PF161、中等过瘤胃淀粉中等饱和脂肪酸组PF131和低过瘤胃淀粉高饱和脂肪酸组PF101)，每个处理组18头奶牛。分别于正试期的第1天、第21天、第49天、第77天和试验结束时采集血样，应用酶联免疫吸附试验法检测HSP70的含量结果显示：在正试期间，牛舍环境温湿指数均值为79．67．奶牛处于中度热应激；初产奶牛血液中HSP70的含量高于经产奶牛：中等过瘤胃淀粉中等饱和脂肪酸组的HSP70含量高于其他两组：HSP70含量随THI变化呈现升高一降低一升高一降低的变化趋势关键词：热应激：HSP70

3、：奶牛；酶联免疫吸附试验(ELISA)热应激是机体应对环境高温所产生的非特异性应奶量、泌乳天数和胎次相近原则．进行随机区组试验设答反应。是外界环境的温度超过等热范围．物理调节不计试验奶牛分3个处理组(高过瘤胃淀粉低饱和脂肪能维持机体热平衡．机体散热受阻．体热蓄积。导致体酸组PF161、中等过瘤胃淀粉中等饱和脂肪酸组PF131温升高而引起机体的非特异性防御反应和特异性障碍和低过瘤胃淀粉高饱和脂肪酸组PF101)．每个处理组在内的全身性适应症[i-31当环境温湿指数fTHI)超过l8头奶牛。试验期共l6周，1周预试期，15周正试期。72时，则可引起奶牛的热

4、应激反应。发生热应激时，每天07：30、14：00和22：00按圈记录一次奶牛躯体等高奶牛会动用机体物理、生化和生理过程进行调节．抵制处环境温湿度。采集血样当天分别测量直肠温度、呼吸热应激产生的负面效应以维持热平衡和正常体温大频率和体表温度，测定时间为07：30、14：00和22：00。多数调节是向环境中散热和减少代谢热的产生【3I1．2日粮组成及营养水平HSP70是应激因素所诱导出的最为显著的蛋白质之日粮参考NRC(2001)推荐标准，按维持需要增加一．它能使动物迅速适应环境的变化．保护机体不受或20％配制等蛋白日粮川．精粗比50：50过瘤胃淀粉推少

5、受损害[63近年来．随着畜牧业产业化和集约化进程算：通过尼龙袋试验测定饲料的瘤胃动态降解率，根据的逐步深入．有关畜禽应激机理的研究显得越来越重要Tamminga提出的公式：PS(％)=DxKp／(Kp+Kd)+O．1xS估热应激蛋自在其他生物上有一定的研究．但在奶牛热应算过瘤胃淀粉含量脚，式中PS(％)为饲料过瘤胃淀粉率；激研究方面．相关文献较少本文采用酶联免疫吸附试S为淀粉中快速降解部分：D为淀粉中慢速降解部分；验(ELISA)法，研究胎次和日粮对HSP70表达的影响．Kp为外流速率常数；Kd为D的降解速率常数；PS(g／kg)及HSP70随试验期T

6、HI变化的规律=Starch(g／kg)xPS(％)／100，式中PS(rag)为饲料过瘤1材料与方法胃淀粉量．Stcrch为饲料淀粉的含量。试验所用日粮组1．1试验设计成及营养水平见表12008年6~9月在上海光明公司朱桥奶牛场．选择541．3试验设计及饲养管理头中国荷斯坦泌乳奶牛．泌乳天数为158+_．32d．根据产试验奶牛拴系饲养，在05：30、12：30、19：30日喂三次；先喂玉米青贮，后喂混合精料和干草，剩料约l0％；自由收稿日期：2010—04—02饮水．饲喂后挤奶。牛舍为东西方向．采用吹风机结合基金项目：“十～五”国家奶业科技支撑‘划(

7、2006BAD04A14和2006BAD12B08)。喷雾降温．这可使环境温度降低5℃左右。作者简介：郭同军(1981一)，男，甘肃人，硕士生，研究方向为瘤胃微生物工程。l_4环境温湿度的记录通讯作者：王加启(1967一)，男，安徽人，研究员，博士生导师，长期从事反刍动物营养和牛奶质量改良研究试验期间牛舍内环境温湿度的记录方法是分别在中圈奶片·2010·8·科技·9·表1试验日粮的组成及营养水平1．6．2操作步骤酶联板分别设空白孑L、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液1001~L．余孑L分别加标准品或待测样品100IxL．注意不要有气泡．加样将样品

8、加于酶标板孑L底部．尽量不触及孑L壁。轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜．37℃反应120rai