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1、第20卷第2期湖北医科大学学报Vol.20,No.21999年4月ActaAcademiaeMedicinaeHubeiApr,1999大鼠活体心脏穿刺采血法盛晖(附一医院普外科,武汉430060)摘要报告一种大鼠活体多次采血法。用1%戊巴比妥钠腹腔麻醉后,剑突下进针,斜行向上刺入2.5～3.0cm即达心脏,回抽。30只SD大鼠,间隔10d采血2ml,共4次,测定Hb、RBC、Hct、WBC、ALT、TP、BUN。结果:采血1000余次,1次穿刺成功率98%以上,且大鼠成活,各次血液成份及生化指标差异均无显著性(P>0.05)。本法操作简便,
2、定位准确,采血量大,可重复采血。主题词心脏;穿刺术/方法;大鼠中图分类号R332在众多的实验动物中,大鼠在医学研究中应用鼠放回笼内。最广泛,常常要抽取鼠血作各种检查,但大鼠采血技术一直又是困扰实验者的一个难题。我们在动物实验中,通过多次开胸观察,发现大鼠仰卧位时,心脏位于胸腔正中。在此启示下,建立了一种大鼠活体心脏穿刺采血法。这种方法一只大鼠可重复多次采血,每次采血量不少于2ml,现介绍如下。1材料与方法1.1材料30只SD大鼠,雌雄兼有,体重238±15g,适应性喂养3d后行第1次采血。以后每隔10d采血1次,每次采血量2.0～2.5ml,
3、共4次。分别测定Hb、RBC、Hct、WBC、ALT、TP、BUN。1.2方法1.2.1麻醉用无菌生理盐水将戊巴比妥钠粉剂配制成1%溶液。按30mg/kg体重用1ml注射器图1大鼠心脏穿刺采血示意图抽取麻醉药行腹腔注射。2结果1.2.2固定在一块40cm×30cm的木板上钉上3颗铁钉,组成一个等腰三角形。将已麻醉的大鼠3年来我们应用本法采鼠血1000余次,1次穿仰卧于木板上,用3把环形钳分别夹持鼠颈、左右腹刺成功率达98%以上,用这种采血法分离的血清或股沟区,环形钳的手柄套扣在铁钉上,固定好大鼠血浆无溶血。(图1)。我们测定了4次采集的血样中
4、血液细胞成份及1.2.3采血于大鼠剑突下脱毛后用碘酒、酒精消主要生化指标,观察多次采血对大鼠血液成份及营毒,操作者右手持注射器,针头紧贴剑突下以30°角养状况的影响,实验结果见表1。进行,刺向心脏。针尖穿过横膈膜继续斜行刺入经t检验同一指标各组间数据两两比较差异均2.5～3.0cm,约相当于7号注射针头长度,边进针无显著性(P>0.05)。表明大鼠每隔10d取血2边回抽针管,可见血液借心脏跳动的力量进入注射ml不会影响血液成份及生化指标。器内,有时还能见到针管内血液随心脏搏动而跳动。我们还观察了这种采血法可能对大鼠胸腔脏器采血后拔出针头,左手
5、按压心脏搏动处1min,将大造成的影响,30只大鼠共采血120次,未发生死亡。第2期盛晖.大鼠活体心脏穿刺采血法131表1大鼠多次心脏采血后血液成份及部分生化指标的变化(x±s)HbRBCHctWBCALTTPBUNd(g/L)(×10/L)(%)(×10/L)(U/L)(g/L)(mmol/L)0146.1±3.07.3±0.848.2±6.312.5±3.627.2±3.671.1±4.24.9±1.410144.5±3.67.6±0.747.4±5.113.1±4.029.1±4.070.5±3.15.1±1.720147.3±2.87
6、.4±0.549.6±7.312.8±5.225.4±3.272.3±4.44.8±1.330142.8±4.37.8±0.648.6±5.913.0±4.228.3±2.871.8±5.05.2±1.2随机取10只大鼠于第4次采血后3d处死,剪开胸性,不稳定,最好现用现配,未用完的麻醉药应置4腔,仔细观察肺脏和心脏,结果均未见陈旧性出血℃冰箱内不超过3d,否则效价减弱。灶,胸腔无积血,心脏无血肿,无瘀斑。(2)采血时,大鼠要保持头、体、尾在一条直线采用本法麻醉的大鼠一般1h左右开始清醒,上,防止体位不正、胸廓扭曲牵拉致心脏移位。随后恢复活动
7、,饮水进食。(3)应沿胸骨柄剑突下潜行进针,边进针边回抽针管,见有血液涌入针管时,固定好注射器。回抽3讨论时,注射器内负压不宜过大,遇回血较慢时,要待心[1]文献报道:大鼠红细胞每45～68d更新一脏充盈后抽吸。7代。每1h进入血循环中的红细胞达2.4×10个;(4)进针深度应依大鼠体重而定,300g以内的大鼠一次失血30%,7d内可以恢复。我们的实验大鼠用7号针头,300g以上的大鼠用8号针头。表明:间隔10d采血2ml,对大鼠血液成份、营养状(5)若要获取血浆,可先用稀释肝素润湿注射况及生命活动均无明显影响。以1只250g体重的器,血液离
8、心后得到。大鼠为例,血量占体重的6%～8%,约合10～12ml(6)大鼠喜群居,白天活动少,常依偎在一起,因血,1次采血2ml,低于全身血量的30%,不会导致此取血
