不同国产酿造大麦蛋白质双向电泳差异性分析

《不同国产酿造大麦蛋白质双向电泳差异性分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、作物杂志Crops2013．6不同国产酿造大麦蛋白质双向电泳差异性分析刘宝祥’朴永哲苏政波董亮袁照路张雨扬赵长新(大连工业大学生物工程学院，116034，辽宁大连；山东省食品发酵工业研究设计院，250013山东济南；大连民族学院生命科学院，116600，辽宁大连)摘要应用双向电泳技术对不同品种的国成进行双向电泳图谱分析，从中找出不同品种国产酿造大麦的蛋白质组成进行了差异性分析。电产大麦的蛋白组成的差异性，同时对这种差异性泳图谱显示，所有供试样品的双向电泳图谱中的进行比较，从而找到国产酿造大麦蛋白组成的共

2、蛋白质点均达到300个左右，几种供试大麦品种性及差异，为利用这种差异进行不同品种间的鉴的蛋白质组成基本相同，蛋白质主要分布于等电定提供技术和数据参考。点7．6—1O．0、分子量大于43．0kDa的区域，其数1材料与方法量占总蛋白质数量的20％左右。而蛋白组成的主要差异蛋白质点共有6个，分子量在43—66kDa1．1材料与仪器之间，等电点在6．5左右，基本上找到了不同品种大麦纯品种：甘啤4号、甘啤7号、垦麦7号、国产酿造大麦蛋白组成的差异。单2号由百威英博啤酒哈尔滨有限公司提供；载关键词大麦；品种；蛋白质

3、组；双向电泳体两性电解质购自美国GE公司；蛋白质提取过程所用试剂为优级纯，其余步骤为分析纯，所用水均大麦是一种重要的粮食作物和酿造啤酒的原为双蒸水。料，在世界各地都有广泛的种植，大麦品种对麦芽圆盘电泳仪(北京六一厂)、Binta2020D凝胶制造及啤酒品质有很大影响。通常鉴别分析成像系统BINTA、PDQuest8．0分析软件(Biorad公大麦品种的主要方法有蛋白质单向电泳法和基于司)。DNA技术的分子标记法J。在啤酒酿造领域主要1．2试验方法采用蛋白质单向电泳法，利用提取的大麦醇溶蛋1．2．1蛋白质

4、提取分别取纯种大麦1g，经手工白进行SDS．PAGE电泳进行品种差异分析，该方法去皮后加液氮研磨，采用缓冲液苯酚法提取水溶具有操作简便、经济、快捷的特点，但是主要缺点蛋白质¨，Bradford法测定蛋白质浓度后分装，置在于其分辨率较低J。目前很多企业越来越多于一80℃冰箱备用。地采用DNA分析法，利用扩增DNA片段进行SSR1．2．2双向电泳①胶条制作：在翟明昌等¨的标记卜加]，其结果准确可靠，但对样品DNA提取方法基础上略加改进：取0．6g尿素、5401~L双蒸操作技术和设备要求比较严格，故成本较高、

5、费水、200L30％丙烯酰胺溶液、pH值4～6载体两时、费力。随着蛋白质组学和蛋白分析技术的发性电解质241~L、pH值3～10载体两性电解质溶液展，运用双向电泳技术进行大麦的品质分析已成4．8L，轻缓混匀后依次加人5IxL10％过硫酸铵为可能。和41xLTEMED。混匀后快速吸取100L上述混鉴于此，选取高纯度的国产酿造大麦品种保合液，从玻璃管(直径1mm，长10cm)的一端缓慢证供试样品的可靠性，利用蛋白质双向电泳技术均匀灌入，注胶量保证每根胶长度为7cm，室温聚结合PDQuest软件对不同品种国产

6、大麦蛋白质组合1h。作者简介：刘宝祥，硕士，研究方向为食品发酵工程②等电聚焦及电泳。阴极电泳缓冲液：赵长新为通信作者，教授，研究方向为啤酒大麦与酵母20mmol／LNaOH150mL，阳极电泳缓冲液：的生理学与蛋白质纽学收稿日期：2013—08—09；修回日期：2013一O8—1410mmol／L磷酸200mL。23作物杂志Crops2013．62．3c5区域蛋白质差异质点均达到300个左右，几种供试大麦品种的蛋鉴于不同品种大麦蛋白组成差异主要集中在白质组成基本相同，蛋白质主要分布于等电点e5区域，选取

7、不同品种在c5区的所有蛋白质，根7．6—10．0、分子量大于43．0kDa的区域，其数量据其位置确定其在图3坐标，并选取其同一条件占总蛋白质数量的20％左右。而蛋白组成的主要下的蛋白质点的3D效果图的高度。该区域肉眼差异蛋白质点共有6个，分子量在43～66kDa之可见的蛋白质点一共有6个，分子量43～66kDa、间，等电点在6．5左右，基本上找到了不同品种国等电点6．1～6．9。通过表2所示，甘啤4号缺失产酿造大麦蛋白组成的差异。本研究为今后逐步点1、3、5三种蛋白，甘啤7号缺失点2、6两种蛋扩大大麦品

8、种的双向电泳图谱，建立酿造大麦蛋白，垦麦7号缺失点3一种蛋白，单2号缺失点3白质双向电泳指纹信息库，并应用其对国产品种一种蛋白；点3蛋白只有甘啤7号含有，点4蛋白的鉴定和遗传资源分析都具有指导意义。4种大麦都有，并且高度相差不大，可能是国产大参考文献麦的一种特征蛋白。[1]黄志仁，许如根，吕超，等．大麦高赖氨酸的遗传与选择研究I．大麦品种蛋白质组分及赖氨酸含量的分析．麦类作物学报，2000，20(4)：22—26．[2]张玉红，巴桑玉珍，寿