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1、2004年2月中成药Feb.,2004第26卷第2期ChineseTraditionalPatentMedicineVol.26No.2[科研报道]野菊花总黄酮提取方法研究阮俊,黄永林(广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所,广西桂林541004)关键词:野菊花;总黄酮;正交试验;提取工艺中图分类号:R284.2文献标识码:B文章编号:10011528(2004)02015302野菊花是菊科植物野菊(ChrysanthemumindicumL.)500nm波长处测定吸收度,以吸收度为纵坐标、浓
2、度为横坐的干燥头状花序,其主要成分为总黄酮,具有清热解毒、降血标,绘制标准曲线。[1,2]3压、抗毒、抑制血小板凝聚等功能,野菊花提取物制成的Y=0.123X-3.1010(r=0.9996),线性良好。栓剂,应用于临床对慢性盆腔炎、宫颈糜烂、慢性前列腺炎等2.2.2供试液的测定精密取供试液5mL,置25mL量瓶[3]有显著疗效。为有效地开发和利用药材资源,充分提取野中,照标准曲线方法进行操作,显色,在500nm波长处测定菊花所含的总黄酮成分,我们采用正交试验的方法进行了提吸收度A1,另精密取供试液5mL,置25mL量瓶中,
3、加蒸馏取工艺的研究。水至刻度,摇匀,在500nm波长处测定吸收度A2,取二次吸1仪器与试剂收度的差值,由回归方程计算样品中总黄酮的含量。1.1仪器2.3提取溶剂的选择日本岛津210A型紫外光谱仪;梅特勒AT200电子天2.3.1乙醇提取精密称取野菊花5g,加到烧瓶中,加乙平。醇100mL,冷浸10min后,在水浴上加热回流1h,分取乙醇1.2试剂与样品液,药渣加乙醇80mL,继续在水浴加热回流30min,合并乙芦丁对照品,购自中国药品生物制品检定所;野菊花购醇液,滤过,滤液置200mL量瓶中,放冷,加乙醇至刻度,摇自玉
4、林市药材批发站,为菊科植物野菊(Chrysanthemumin匀,精密量取10mL,置50mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇dicumL.)的干燥头状花序。匀,作供试液,待用。2方法与结果2.3.2水提取按供试液的制备方法项下操作。2.1对照品及供试品溶液的制备2.3.3结果比较上述供试液按含量测定项下的方法测定2.1.1对照品溶液的制备精密称取经120C干燥至恒重野菊花总黄酮含量,测定结果见表1。的芦丁对照品25mg,置50mL量瓶中,加乙醇适量,使充分表1提取溶剂选择结果(n=3)溶解,放冷,用乙醇稀释至刻度,
5、摇匀。精密量取20mL,置提取方法野菊花总黄酮含量(%)RSD(%)50mL量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即得(每1mL含芦丁乙醇提取法3.37%1.89[4]对照品0.2mg)。水提法3.29%2.102.1.2供试液的制备精密称取野菊花5g,加到烧瓶中,加水100mL,冷浸10min后,在水浴上加热回流1h,分取滤由表1结果可知,乙醇提取略优于水提取。但考虑到在液,药渣加水80mL,继续水浴加热回流30min,滤过,合并实际生产中,野菊花在提取过程中会吸收2~3倍的溶剂,造滤液,滤液置200mL量瓶中,放冷,加水至刻度
6、,摇匀,精密成生产成本显著增加,因此本试验选择廉价的水作为试验提量取10mL,置50mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,作供取溶剂。试液,待用。2.4水提取工艺的考察2.2含量测定2.4.1考察因素及水平:选择提取次数、提取温度、提取时2.2.1标准曲线的制备精密量取对照品溶液1.0,2.0,间和用水量等4个因素,每个因素选择3个水平,编制因素3.0,4.0,5.0,6.0mL,分别置于25mL量瓶中,各加水至6水平表见表2。2mL,加5%亚硝酸钠溶液1mL,使混匀,放置6min,加10%2.4.2试验与结果:准确称取野
7、菊花5g,按L9(3)正交表硝酸铝溶液1mL,摇匀,放置6min,加1%氢氧化钠溶液10设计方案进行试验,提取液稀释至200mL作供试液,进行mL,再加水至刻度,摇匀,放置15min,以相应的试剂溶液为含量测定,以测得野菊花总黄酮含量为指标进行分析。结果空白。按分光光度法(中国药典2000年版一部附录B),在见表3。收稿日期:20030114作者简介:阮俊(1966~),男,广西博白人,助理研究员。主要研究方向:植物化学研究。电话:07733550075。1532004年2月中成药Feb.,2004第26卷第2期Chin
8、eseTraditionalPatentMedicineVol.26No.2A2B3C3D1,即野菊花用水提取2次,溶剂用量依次为8、6倍,表2野菊花总黄酮提取工艺因素水平表提取温度100C,提取时间为40、40min。因素A1)提取B提取C
