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时间:2017-12-07
《不育温度下油菜温敏雄性不育系ssh文库的构建》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、云南农业大学学报JournalofYunnanAgriculturalUniversity,2014,29(1):6—10http://xb.ynau.edu.cnISSN1004—390X;CODENYNDXAXE-mail:xb@ynau.edu.cnDOI:10.3969/j.issn.1004—390X(n).2014.01.002不育温度下油菜温敏雄性不育系SSH文库的构建叶晓明,彭少丹,陈升位,陆娜,林良斌(1.云南农业大学农学与生物技术学院,云南昆明650201;2.云南农业大学农科专
2、业实验教学中心,云南昆明650201)摘要:以温敏雄性不育系K121S在可育温度(10℃)下和不育温度(26oC)下三核期花蕾为材料,以可育温度下的cDNA为驱动子,通过抑制性差减杂交技术构建了不育温度下抑制性差减杂交(SSH)文库,其插入片段长度分布在200~1000bp左右,并随机挑选97个阳性菌落测序,得到20个表达序列标签(EST),包括与ATP合酶B亚基、Rubp羧化酶小亚基同源的EST等,为进一步获得育性转换相关基因和揭示K121S的育性转换分子机理奠定了基础。关键词:油菜;温敏雄性不育
3、;抑制性差减杂交;文库中图分类号:S634.302.2文献标志码:A文章编号:1004—390X(2014)01—0006—05SSHlibraryConstructionofBrassicajunceaL.Thermo·sensitiveMale-sterileLineatSterileTemperatureYEXiaoming,PENGShaodan,CHENShengwei,LUNa,LINLiangbin(1.CollegeofAgronomyandBiotechnology,YunnanA
4、griculturalUniversity,Kunming650201,China;2.ExperimentalTeachingCenterforAgriculturalProfessionalCourse,YunnanAgriculturalUniversity,Kunming650201,China)Abstract:Inthisstudy,usingflower—budatthinueleatestagefromthermo-sensitivemale-sterilelineK121S(Bra
5、ssicajuncea)atfertiletemperatureandsteriletemperatureasmaterial,SSHlibrarywasconstructedwithdrivercDNAobtainedatmale—fertiletemperature.Ninety—sevencloneswerechosenrandomlyinsequencing.TwentyESTwerediscoveredanalogoustogenessuchasATPsynthetasesub—unitb
6、eta,ribulose一1,5-bisphosphatecarboxylasesmallsubunit.ThesizeoftheDNAinsertedrangesfrom200to1000hp.ThelibrarylaidthefoundationofobtainingofthegenesforfertilityconversionandclarificationofmolecularmechanismofK121Sfertilityconversion.Keywords:rapeseed;the
7、rmo-sensitivemalesterility;suppressionsubtractivehybridization;library作物杂种优势利用是增高作物产量的重要途材料有细胞质负效应、育性不稳定、恢复源稀有径。目前油菜杂种优势利用的途径有细胞质雄性及胞质单一化等缺点,转育困难,不易得到优良不育、细胞核雄性不育、光温敏雄性不育、自交不育系。而利用光温敏不育进行育种不仅选育程不亲和系、化学杀雄等。细胞质雄性不育是油菜序简单、不需要保持系、组配自由、育种周期短,杂种优势利用的主要途径,但是细
8、胞质雄性不育而且选配出的杂交种表现出明显的优势⋯。因收稿日期:2013—05—21修回日期:2013—09—04网络出版时间:2014—01—0710:17基金项目:国家自然科学基金项目(31160289)。作者简介:叶晓明(1986一),男,河北大名人,在读硕士研究生,主要从事生物化学与分子生物学研究。E—mail:yexiaoming1232006@126.corn通信作者Correspondingauthor:林良斌(1963一),男,湖南武冈人,教授,主要从事
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