乙肝核心抗体IgM.pdf

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1、乙肝核心抗体IgMHBcIgMELISA用途乙型肝炎核心抗体的英文缩写为抗-HBc。是人体感染乙型肝炎病毒后第一个出现的抗体，是人体感染乙型肝炎病毒血清学标志物之一。乙型肝炎核心抗体又可分为乙型肝炎核心抗体IgM（抗HBc.IgM）和乙型肝炎核心抗体IgG(抗HBc.IgG)两种，前者随ALT升高而不断增长。大约在乙型肝炎病毒感染后1-2个月时，随者ALT升高而不断增长。大约在乙型肝炎病毒感染后1-2个月时，随之产生的便是乙型肝炎核心抗体IgG。有人认为，抗HBc.IgM是乙型肝炎病毒新近感染或持续复制的标志，这种抗体持

2、续阳性提示疾病迁延，而抗HBc.IgG的持续存在只能说明以往有过乙型肝炎病毒感染。因此，乙型肝炎核心抗体IgM和IgG平行检测，有助于对急性乙型肝炎与隐匿型乙型肝炎和乙型肝炎病毒携带者急性发作之间的鉴别。约有20%急性乙型肝炎病人的血清中查不到乙型肝炎表面抗原，而乙型肝炎核心抗体IgM可阳性，而且与病情变化相一致，病情恢复，乙型肝炎核心抗体IgM阴转。当病情重新活动时，ALT重新出现异常时，乙型肝炎核心抗体IgM亦重新出现阳性，滴度上升。所以说，乙型肝炎核心抗体IgM是用来评价乙型肝炎病情的较好指标。本试剂盒用于定性和半

3、定量检测人血清中的HBcIgM抗体浓度。试剂盒组成(储存于2-8°C)酶标板96wells浓缩洗涤液(20X)30ml终止液12ml阳性对照1vial显色液12ml酶联物6ml样品稀释液100ml阴性对照1vial抗原6ml需要但未提供的材料1.可在450nm处进行读数的酶标仪；2.能精确吸取10-200µL的移液器；3.可调多道（8）移液器（50－200µL）；4.供可调多道移液器使用的试剂存放槽；5.洗瓶或洗板机；6.蒸馏水或去离子水；7.1升的圆柱形量筒；8.血清移液器：1和（10或25mL）；9.移液器枪头；10

4、.纸巾；11.计时器，用以监控温育步骤；12.处理池和消毒剂（例如：0.5%次氯酸钠,10%家用漂白水）；注意事项:1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。2.洗板不正确可以导致假阳性或假阴性结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。3.消除板底残留的液体和手指印，否则影响OD值。4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色，已经变蓝的底物液不能使用。5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。6.在储存和温育时避免强光直接

5、照射。7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。9.不能使用过期产品。10.如果可能传播疾病，所有的样品都应管理好，按照规定的程序处理样品和检测装置。标本收集1.用无菌静脉采血程序采集的新鲜血清和正确保存的血清可用在本试剂盒上。不需添加任何抗凝剂或进行预处理。避免使用溶血标本，脂质标本或微生物污染的血清。2.室温（20－25℃）下保存标本不要超过8小时。2－10℃保存血清，不超过48小时。如耽搁的时间更长

6、，请在-20℃或更低的温度下保存标本。标本避免多次冻融，这样可能会损失抗体活性，产生错误结果。准备工作1.试剂盒应平衡至室温再试验。2.20X浓缩洗涤液用双蒸水稀释成1X（至600ml）。未用完的放回2-8°C。3.用样品稀释液1:500稀释样品,即1ul血清加入500ul样品稀释液中,混匀。阴、阳性对照不稀释。试验过程1.取出所需板条，其余仍密封放回2-8°C。2.加入100ul阴性对照、100ul阳性对照、100ul已稀释标本于相应孔中,空白孔中不加任何液体。3.轻轻混匀，水浴箱中37°C20分钟。4.洗板：甩尽孔内

7、液体，每孔加入洗涤液350ul,静止30秒后甩尽液体，在厚叠吸水纸上拍干，洗5次。5.每孔先加入抗原50ul,轻轻摇匀，再加入酶联物50ul,轻轻混匀2分钟。水浴箱中37°C20分钟。6.洗板：甩尽孔内液体，每孔加入洗涤液350ul,静止30秒后甩尽液体，在厚叠吸水纸上拍干，洗4次。7.每孔加入显色液100ul,轻轻混匀，20-25°C20分钟。8.每孔加入终止液100ul，混匀，以空白孔调零，在450nm处读数。结果判断判断值=阴性对照的OD值×2.1(当阴性对照的OD值小于0.05时，以0.05计)阳性：标本的OD值

8、≥判断值；阴性：标本的OD值<判断值。