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《鸡传染性支气管炎 抗体检测试剂盒的研制.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、-27-试验研究中国动物检疫2004年第21卷第3期文章编号:1005-944X(2004)03-0027-03鸡传染性支气管炎ELISA抗体检测试剂盒的研制1)2)3)王君玮尹燕博刘清河郭福生孙淑芳赵德明王志亮(农业部动物检疫所山东青岛266032)摘要:采用加蔗糖垫离心纯化鸡传染性支气管炎病毒(IBV)制备抗原,用提纯的IBV抗原包被微量板,建立了检测鸡传染性支气管炎(IB)抗体的ELISA试剂盒。抗原、被检血清和酶标结合物的最佳工作浓度分别为10ug/ml、1∶200和1∶3200。与IDEXX试剂盒相比,其敏感性、重复
2、性、特异性均接近国外同类产品水平。对SPF鸡血清、实验免疫与攻毒的SPF鸡血清进行检测,结果表明所建立的ELISA特异性为95.6%,与IDEXX试剂盒符合率为95.6%。用于检测抗IBV特异性IgG抗体发现在免疫接种IB弱毒苗后,第4天即可检测到IgG抗体,峰值在第3周。试验鸡在通过滴鼻、点眼途径人工感染IBV强毒后,第5天抗体滴度明显上升。我们认为,该法是目前我国SPF鸡质量监测、养鸡生产中进行IB监测较好的方法。关键词:鸡传染性支气管炎,IBV-ELISA,抗体检测鸡传染性支气管炎(AvianIn2IB抗体检测方面,酶联
3、免疫吸附试HI在国内被广泛用于IB抗体检fectiousBronchitis,IB)是由冠状病毒验(ELISA)已为OIE确定为标准方测,但其抗原稳定性和检测结果可科(Coronaviridae)冠状病毒属法在SPF鸡检测和国际贸易检疫中重复性差。ELISA与VN、AGP以及(Coronavirus)的鸡传染性支气管炎使用。近年来,美、英等国家已把IB的HA/HI相比,其稳定性、特异病毒引起的鸡的一种急性、高度接ELISA技术成功地用于IB检测,并性、敏感性强,反应迅速,出结果触性传染病,主要引起呼吸道感染、已有成形的商品化E
4、LISA试剂盒快。但是目前我国尚无成熟的商品[1,2]肾炎、产蛋下降及蛋壳质量问题。,但价格昂贵。国内常用实验室化ELISA试剂盒。为此,我们在间在世界各国SPF鸡检测及进出境禽诊断方法有琼扩试验(AGP)、病毒接ELISA基础上成功研制了传染类检疫中被列为必检疫病之一。中和试验(VN)、血凝/血凝抑制试性支气管炎ELISA抗体检测试剂为了快速准确地诊检该病,国验(HA/HI)、ELISA等方法,也有用盒以满足我国SPF鸡质量检测和内外禽病学者进行了大量研究。在反转录聚合酶链反应(RT-PCR)养鸡生产的实际需要[3,4]作诊
5、断和定型的报道。PCR因1材料与方法1)山东澳兰生物工程研究院266515所需配套仪器设备等原因,很难普1.1实验动物2)吉林农业大学动物科技学院1301183)中国农业大学动物医学院100094及;AGP操作方便,但敏感性较差;SPF鸡及SPF鸡蛋:购自山东(上接第19页)加工工艺进行,产、经营和消费行为。经营者不得健康素质,树立政府执政为民的良切实保证肉品和外观良好。经营来自非定点屠宰加工和无无公好形象都具有极为重要的意义。所3.2.3.4实行市场准入制害绿色产品证书的牛羊产品,宾馆、有的动物要变成可供消费的肉品在屠宰加工
6、这一环节设立动物饭店不得消费没有绿色产品证书的或其它产品,都必须要经过屠宰加检疫和肉品品质检测点,对屠宰加牛羊肉,形成合力,堵塞漏洞,使私工这一关,因此屠宰检疫、肉品质工的胴体逐只检疫,抽样检测,合格自屠宰加工,未经过检疫,没有获得量检验就是确保肉品卫生质量的者发给无公害绿色产品证书,凭此无公害绿色产品证书的肉品找不到一道“总闸门”,这道关口把好了,证进入市场。市场管理部门把好查销售渠道,从而保证创立无公害绿动物疫病以及肉品中药物残留、二证验物关,无此证者一律不准进入色清真牛羊肉优质品牌行动的顺利次污染等问题就可迎刃而解,加上
7、市场。实施。回族地域优势和回族同胞对牛羊3.2.3.5加强监督检查,以监促检4结束语肉屠宰加工的严格要求,以牛羊实市动物防疫监督机构要充分行由上可见,大力发展牛羊肉产行定点屠宰,集中检疫为突破口,使法律法规赋予的监督职权,经常业,建立无公害绿色清真牛羊肉优创出我市无公害绿色清真牛羊肉对广大经营者和宾馆、饭店等单位质品牌,对发展我市经济,促进对优质品牌是非常必要和大有可为进行动物卫生监督检查,规范其生外贸易,增加农民收入,提高国民的。©1995-2004TsinghuaTongfangOpticalDiscCo.,Ltd.All
8、rightsreserved.CHINESEJOURNALOFANIMALQUARANTINE2004,21(3)-28-省农科院家禽研究所;成年健康兔:孔加阴性对照,进行ELISA测定。结ml浓度的EDS-76抗原吸收阻断体重2～3kg,购自青岛某养兔场。果抗原最佳稀释浓度
