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1、中国卫生检验杂志2009年4月第19卷第4期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology,Apr2009;Vol19No4755【论著】荧光PCR法半定量肺炎支原体的研究11123胡大康,张瑾,刘池波,杨敏,李向阳(11浙江省台州市立医院检验科,浙江台州318000;21浙江省台州市立医院儿科,浙江台州318000;31温州医学院附属第二医院检验科,浙江温州325027)[摘要]目的:研究MPLI(肺炎支原体载量指数)的参考范围,探讨其在儿童肺炎支原体(MP)感染诊断中的应用价值。方法:200
2、8年3月末采集3～6岁健康儿童咽拭子标本128例,采用FQ-PCR法分别检测MP-DNA和Hactin-DNA后计算MPLI值:MPLI=-lg(MP-DNA拷贝量/Hactin-DNA拷贝量),然后算出MPLI的参考范围(P5)。2008年3月～7月于我院儿科采集临床患儿咽拭子标本110例及其双份血清,分别用FQ-PCR法和MP-IgM法检测咽拭子和血清标本。以单次或双次MP-IgM型抗体阳性作为判定MP感染的标准,算出各种方法的SEN、SPE、+PV、-PV,并制作MPLI的ROC曲线。比较P5与ROC曲线所得界值的优劣。结果:
3、ROC所得MPLI界值优于128例健康儿童MPLI的P5界值,所以,3～6岁儿童咽拭子MPLI的参考范围为:≥5190。根据金标准,110例标本中有26例确诊为MP感染;以此为基础,一次MP-IgM法的SEN、SPE、+PV、-PV分别为7311%、10010%、10010%和9213%;两次MP-IgM法的均为10010%;单一FQ-PCR法的依次为2619%、9512%、6316%和8018%;MPLI的依次为2619%、9818%、8715%和8114%。结论:(1)单一FQ-PCR法测定MP-DNA的弱点很明显:假阳性率高,
4、主要由于未对临床标本进行“标准化”,故而大大限制了其在临床上的大规模应用。(2)MPLI的优点在于对临床标本进行了“标准化”,充分弥补了单一FQ-PCR法假阳性率高的弱点,结果更具说服力;MPLI能早于MP-IgM法诊断MP急性感染。(3)在允许(如经济状况等)的情况下,MPLI和MP-IgM法的结合将会是很好的组合,既能早期发现MP急性感染,又能准确诊断MP感染的恢复(早)期状态。[关键词]肺炎支原体;儿童;感染;FQ-PCR+[中图分类号]R37512[文献标识码]A[文章编号]1004-8685(2009)04-0755-06
5、Studyonsemi-quantitationofMycoplasmapneumoniaebyfluorescencequantitativePCR11123HUDa2kang,ZHANGJin,LIUChi2bo,YANGMin,LIXiang2yang(11DepartmentofLaboratoryTests,TaizhouMunicipalHospital,Taizhou318000,China;21DepartmentofPediatrics,TaizhouMunicipalHospital,Taizhou318000,
6、China;31DepartmentofLaboratoryMedicine,TheSecondAffiliatedHospitalofWenzhouMedicalCollege,Wenzhou325027,China)[Abstract]Objective:ToinvestigatethereferencerangeofMPLI(Mycoplasmapneumoniaeloadindex)anditsusefulnessinthediagnosisofMycoplasmapneumoniae(MP)infectioninchild
7、ren1Methods:128throatswabswerecollectedfrom128healthychildrenagedbetween3and6yearsattheendofMarch20081FluorescencequantitativePCR(FQ-PCR)assaywasusedtoana2lyzeMP-DNAandhumanactin-DNA(Hactin-DNA)forthoseswabs1MPLIwasthencalculated:MPLI=-lg(MP-DNAcopies/Hactin-DNAcopies)
8、,followedbythecalculationofitsreferencerage(P5)1110throatswabswerecollectedwithpairedserafromthedepartmentofpediatryi
