Caco2细胞体外吸收模型的建立、评价及其在营养素吸收研.pdf

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1、◆第九届中国蛋品科技大会论文集Caco-2细胞体外吸收模型的建立、评价及其在营养素吸收研究中的应用杨芳，金永国，蔡朝霞，黄茜，马美湖’(1．华中农业大学国家蛋品加工技术研发分中心，武汉430070)摘要：本研究的目的是建立Caco一2细胞体外吸收模型并对其进行评估。细胞接种在Transwell转运培养槽的微孔滤膜上，进行体外培养。采用细胞形态学、碱性磷酸酶活性、跨膜电阻值和荧光黄通透率等指标对细胞模型进行检测。结果发现Caco-2细胞培21d后，细胞间形成紧密连接，微绒毛亦整齐致密；碱性磷酸酶活力比

2、(A驯BL)随时间的增加而迅速增长，第21d后比值达到14．85士0．164；跨膜电阻值达到恒定值，为(5004．12)Q·cnl2；荧光黄通透率P。为3．35x10～cm／s，低于通透实验规定的5．0x10刁em／s。在本实验室条件下构建的Caco．2细胞模型在形态上与小肠上皮细胞相似，细胞己产生极性，模型的完整性、紧密性与通透性都通过了验证，可作为小肠吸收的体外模型，在营养素吸收转运、生物利用度及代谢机制研究中有不可取代的意义。关键词：Caco-2细胞；模型评价；转运实验：营养素吸收研究中图分类

3、号：R151．3文献标识码：AEstablishment,assessmentandapplicationtonutrientabsorptionofCaco-2cell伽vitroabsorptionmodelYangFan91，JINYong．guo，CAIChao—xia，HUANGQian，MAMeihul“(DepartmentofFoodScienceandTechnology,NationalResearchandDevelopmentCenterforEggProcessing,Wu

4、han430070,China)Abstract：ToestablishandassesstheCaco-2cell／nvitroabsorptionmodeLCaco-2cellswereculturedonthepolycarbonatemembraneinsertsfixedintranswelltransportchamber．Thecellmorphology,alkalinephosphataseacti、，ities．transepithelialelectricalresistanc

5、eandLuciferYellowapparentpermeabilitycoefficientwaz'emonkoredduringculture．After21daysof／nvitroculture，formationoftightjunctionwasobservedbetweenthecells．111ealkalinephosphataseactivityintheapicalsidewassignificantlyincreasedandhigherthanthatinthebasol

6、ateralsidewiththetimewhichtheratioofalkalinephosphatasewas14．854-0．164。thetrans印ithelialelectricalresistancereachedarelativelystablevalueof5004．12Q’cn?，andtheLuciferYellowapparentpermeabilitycoefficientwas3．35x10。。7cm／swhichlowerthan5．Ox10～cm／saccordin

7、gtoprovision．TheestablishedCaco一2eellmodelshowssimilarmorphologytointestinalepithelialcellswithformationofpolarity,canbeusedasaninvitromodelforabsorptionstudies，andthemodelisimportanttostudyhumannutrientabsorption,transport,bioavailability,andmetabolis

8、m．Keywords：Caeo-2cell；Assessmentofabsorptionmodel；Transportstudy；Nutrientabsorptionstudies0引言研究各种药物、营养素(蛋白质、糖、脂肪、微量元素等)及毒素吸收的机理一直是营养领域的热点所在，也是支撑开发各种营养素增强剂的技术理论基础。尽管营养素在体内吸收过程各不相同，但探讨营养素分子对小肠肠壁黏膜的渗透性、营养物质动力学．结构的定量构效关系、营养素分子在消化道的生物转化和(或)代