不同时间注射pmsg和hcg对小鼠超排卵效果的影响

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1、山西医科大学学报，2014年1月，第45卷第1期·23·不同时间注射PMSG和HCG对小鼠超排卵效果的影响陈喜英，郭永昌，刘田福(山西医科大学实验动物中心，太原030001；通讯作者，E—mail：13603518575@l63．com)摘要：目的探讨不同时间注射孕马血清激素(PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)对小鼠超排卵效果的影响。方法选用40只6周龄Fl昆明小鼠，随机分成4组，分别在同一天的11：o0，13：o0，15：o0，17：o0注射PMSG5IU，48h后注射HCG5IU，然后与公鼠合笼；次日晨检查阴栓，阳性者于当日10：oo处死取卵，计数受精卵的数量。结果11：OO，

2、13：00，15：O0和17：00组平均每只获取可用受精卵9．8枚、24．8枚、11．5枚、4．7枚。结论在13：00注射PMSG，48h后注射HCG对小鼠超排效果最好。关键词：孕马血清；人绒毛膜促性腺激素；超排卵；注射时间中图分类号：R一33文献标志码：A文章编号：1007—6611(2014)01—0023—03DOI：10．3969／J．ISSN．1007—6611．2014．01．007EfectoftheadministrationtimeofPMSGandHCGonthesuperovulationinmouseCHENXiying，GUOYongchang，LIUTianf

3、u(ExperimentalAnimalCenter，ShanxiMedicalUniversity，Taiyuan030001，China；Correspondingauthor，E—mai1：13603518575@163．tom)Abstract：DctiveToexploretheefectoftheadministrationtimeofPMSGandHCGonthesuperovulationinmouse．MethodsFoay6-week-oldF1micewererandomlydividedinto4groups．Themicewererespectivelyinje

4、ctedwithPMSG5IUat11：00，13：00，15：00and17：00，andHCG5IU48hlater，andthenmatedwithmalemice．Thevaginalplugwascheckednextmorning．Thepositivemicewerekilledat10：00tocalculatethenumberoffertilizedeggsatthesameday．ResultsAfterinjectingPMSGat11：00，13：00，15：00and17：00，theaverageusableembryospermousewere9．8，24

5、．8，11．5and4．7，respectively．ConclusionInjectingPMSGat13：00andHCG48hlaterhasthebesteffectonthemousesuperovulation．Keywords：PMSG；HCG；superovulation；administrationtime近年来，随着转基因技术的迅速发展和成熟，转品系、鼠龄及体重等。为了进一步探讨有效的小鼠基因动物在生物医药、生命科学研究领域得到越来超排卵方法，我们在控制其他条件一致的情况下，对越广泛的应用。国际上报道了多种得到转基因动物给予激素的时间做了实验分析，以求找到一个最适的方

6、法，目前真正成熟并可以稳定得到转基因动物宜的注射时间，能得到最大数量及最好质量的可用的方法主要有三种，即原核显微注射法、精子介导的于显微注射的受精卵。基因转移法和核移植。其中，显微注射法是转基因1材料与方法最简单、最常用的的方法，其操作步骤包括受精卵的1．1实验动物采集、显微注射和胚胎移植。要取得原核显微注射清洁级昆明系白小鼠雌雄各40只，由山西医科的高成功率首先要得到质量好、数量多的原核期受大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK(晋2009—精卵。小鼠在生理状态下一次排卵10—15颗，远不0001)；雌鼠作为供体鼠，5周龄，体重20—25g；雄能满足实验的需要。为了增加可获得的卵子数

7、量，鼠8周龄，体重35g左右。动物房饲养环境温度用孕马血清(PMSG)模拟促卵泡激素，用人绒毛膜20—24℃，相对湿度50％一55％，光照周期7：30—促性腺激素(HCG)模拟黄体生成素(LH)可以诱发19：30，正常饲料及饮水。交配雌鼠排卵多于正常排卵数即超排卵。超排反应1．2主要试剂与器材是一个由一系列极其复杂的生理过程累积而产生的M2培养液，M16培养液，透明质酸酶，矿物油结果，影响因素诸多⋯，包括动物遗传特性、体况、均购自美