灰飞虱共生菌引起的细胞质不亲和性

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时间:2017-12-07

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1、第卷第期复旦学报自然科学版年月〔乡,灰飞虱共生菌引起的细胞质不亲和性‘‘‘邓可京杨淡云胡成业十遗传学研究所环境和资源生物学系一提要对我国个地区和日本个地区灰飞虱的。六感染率,用技术进行了检测,结果表明中国的辽宁、北京、上海和云南的灰飞虱的方’“感染率均接近厂四川为写而宁夏为各地区灰飞虱间的交配实验证明了、、引起的细胞质不亲,、和现象的存在耐乃’八的部分测序分析表明上海云南和日本出云的灰飞虱感染的同为一,耐’,’这一结果为掌握灰飞虱的共生关系利用灰飞虱体内共生菌防治水稻条叶枯病毒病提供依据现象的研究,可以在多种虫媒传播的动植物疾病防治上应用,开辟出一条基因工程防治的新途径关键词灰飞虱耐细

2、胞质不亲和检测中图法分类号细胞质不亲和,是昆虫共生微生物感染而引起的宿主发育缺陷,具备不同细胞质的雌雄个体在交配后表现出不同程度的后代不育现象的首次报道见,二’〕目前,已在目的多种昆虫中有记载川现于尖音库蚊。声州梦象与昆虫体栖居的共生生物,尤其是类立克次体一,如尸。,‘有关联二弓耐。去存在于宿主的含菌体的细胞内以经卵传递方式环。,传至后代对’,属,’,共生菌的大量研究表明它可以作种间和种内的水平,而共生菌与宿主间的相互作用对现象的表现与否以及程度均产生重大影转移响川研究现象的重要意义还在于,它有可能在多种虫媒传播的动植物疾病的防治上应用,并开辟出一‘〕条崭新的基因工程防治途径,目前,我

3、们正以这一策略开展了灰飞虱心刁二、,、传播的水稻条叶枯病毒病的研究工作本文以我国个省市及日本国共个地区,、、采集的灰飞虱为材料研究了,’五对该宿主的感染率细胞质不亲和性以及环耐部分序列的同源性现将研究结果报道如下收稿日期。一一一第一作者邓可京,理学博上,副教授复旦大学遗传学研究所,上海、本文由博士生导师苏德明李昌本教授推荐美国和上海市生命科学中心资助课题©1994-2010ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net乃,引起的细胞质第期邓可京等灰飞虱共生菌讨不亲和性

4、材料与方法材料、、、、供试的灰飞虱分别采自我国辽宁铁岭、北京通县宁夏青铜峡四川西昌上海宝山和云南楚雄等地时间为年各地区水稻秧苗期日本出云、筑波。和东京‘灰飞虱的二个虫系由日本农林生产省蚕丝昆虫研究所野田,并在实验室饲博明博士惠赠养的纯系方法交配将预定用于交配的龄若虫,旬试管中放一头待羽化后取雌雄各一头移入同一试管饲养后移出成虫进行检测移出成虫的试管放至后,计算若虫的头数检测检测的方法基本参照文献「〕模板的提取每头虫为一个独立的样品将灰飞虱成虫的腹部切下放人预冷的矛一飞厂,砂一拜中,处理污离心上清作为研磨水浴件扩增用的模板一·。〔‘之,气引物犷,的引物序列为一一’一’,和口〔仁八丁扩增片

5、断为昆虫线粒体入的引物序列为伙一‘‘一一’,和弓八二丁扩增片段为反应扩增的反应体积为沪,其中,引物各子,川酶扩增条件为万变性退火延伸个循环后,于延伸使反应充分进行反应结束后,的琼脂糖凝胶电泳检测的测序产物首先用酒精沉淀,用切平后,插人切开的载体’中筛选转化子经扩增提取的转化子按,测序说明书进行标记使用结果不同地区灰飞虱的加感染率以耐。一和作为对照的昆虫线粒体的的部分片段的©1994-2010ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net©1994-2010ChinaA

6、cademicJournalElectronicPublishingHouse.Allrightsreserved.http://www.cnki.net第期邓可京等灰飞虱共生菌。引起的细胞质不亲和性表不同地区灰飞虱的交配试验结果、’’雌虫,雄虫,代雄虫代若虫数雌虫若虫数上海上海北京北京云南四川址于十宁夏一四川辽宁辽宁云南丰云南四川一辽宁北京一升宁夏一辽宁上海干上海宁夏一云南未宁夏一北京上海辽宁十云南十四川一辽宁弓上海一上海十四川一筑波宁夏一又为耐,共生菌十为阳性一为阴性感染的雌虫可以与任何的雄虫交配,并有后代出现而未感染、的雌虫只能在与未感染的雄虫交配时,,各地才有代出现从表中可以看

7、出区间的灰飞虱交配结果,均符合的表现规律但是在某些组合如云南辽宁中,虽有若虫出,现但其数量很少的部分序列分析方六全长约为鉴于细菌的在进化中具高保守性,本研究仅对其一的进行测序结果表明,中国上海、云南及日本出云三地区的灰飞虱群体所感染的耐’的序列完全相同见第页图而且与、,已发表的,’的进行比较其同源性为环讨论自等二’〕在尖音库蚊中发现可引起细胞质不亲和现象以来,许多研究,者对多种昆虫进行了研究特别是对感染的的研究更为详细这些研究表明,这一特性内在

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