【毕业设计-医学论文】关于口腔鳞状细胞癌组织p73与p53基因表达及意义.doc

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1、关于口腔鳞状细胞癌组织p73与p53基因表达及意义作者：管宏伟尚伟杨学财岳金贾暮云【摘要】目的探讨P73、P53蛋白在口腔鳞状细胞癌屮的表达及与肿瘤侵袭和转移的关系。方法应用免疫组织化学通用型两步法检测50例口腔鳞状细胞癌病人的癌组织和癌劳正常组织屮P73.P53蛋白表达。利用计算机图像分析得出平均吸光度（AOD）并进行统计学分析。结果口腔鳞状细胞癌组织P73、P53蛋白的表达明显高于癌旁组织（—2.798、2.913,P0.05）。结论P73、P53可作为评估口腔鳞状细胞癌生物学行为和预后的独立指标。【关键词】癌,

2、鳞状细胞；口腔；基因，p73；基因，p53[ABSTRACT]ObjectiveTostudytherelationsbetweenP73andP53expressionandinvasionaswellasmetastasisinoralsquamouscellcareinoma（OSCC）.MethodsTheP73andP53weredetectedincarcinomaandnon-carcinoma,tissuethatadjacenttocareiriomain50OSCCpatientsbyimmuno

3、histochemistrymethod.Theresultswereevaluatedbycomputer-aidedimageandaverageopticaldensity（AOD）analyzedstatistically.ResultsTheexpressionsofP73andP53inOSCCweresignificantlyhigherthanthatintheadjacenttissue（u=2.798,2.913;P0.05）.ConclusionTheexpressionofP73andP53c

4、anbeusedasanindependentparameterinpredictingthebiologicalbehaviorandprognosisofOSCC.[KEYWORDS]Carcinoma,squamouscell;Mouth;Gene,p53;Genep73p73基因作为p53基因家族的第一个成员，于1997年首先由KAGHAD等[1]发现。p73基因编码的P73蛋白，在结构和功能上均与P53蛋白具有很高的同源性[1,2],且与肿瘤的发生密切相关。因此，P73作为候选的抑癌基因，受到广泛关注。木文

5、应用免疫组织化学方法对口腔鳞状细胞癌组织和癌旁组织屮P53和P73蛋白表达进行检测，探讨英在口腔鳞状细胞癌侵袭和转移过程屮的意义。1材料和方法1.1病例选择选择2005年1月〜2007年12月在我院口腔颌面外科手术治疗的原发口腔鳞状细胞癌病人50例，男34例，女16例；年龄29〜80岁，屮位年龄62.5岁。其屮舌癌24例，颊癌、牙龈癌、口底癌、腭癌、廉癌共26例。所有病例均行原发灶扩大切除及颈淋巴清扫术，手术标木均经石蜡固定、苏木精-伊红染色，常规病理检查。按照UICC2002年标准进行TNM分期[3],T1期17例

6、，T2期20例，T3期9例，T4期4例;病理分级：高分化28例,中、低分化22例。有颈淋巴结转移者20例，无转移者30例。取其癌组织、癌旁正常组织（指肿瘤边缘外2.0cm以上的黏膜组织）及颈清切除的颈淋巴结的石蜡标木进行研究。全部病例术前均未接受放疗或化疗。1.2主要试剂和仪器鼠抗人P73和P53单克隆抗体（北京屮杉金桥生物技术有限公司）；PV6000二步法免疫组化检测试剂盒（Zymed公司，美国）；粘片剂APES（北京屮杉金桥生物技术有限公司）；PBS磷酸缓冲液（浓度0.01mmol/L,pH7.2〜7.4）；OL

7、YMPUS显微镜（BH-2,日本）;SamplePCI图像分析软件（美国）。1.3免疫组织化学染色存档的蜡块均经病理检資证实，用LEICA石蜡切片机做4um厚连续切片3张，1张作空片对照，2张行免疫组化染色。采用免疫组化通用型两步法染色，参照试剂盒说明书进行。用已知阳性切片做阳性对照，用缓冲液代替一抗做阴性对照。1.4结果判断及图像分析以细胞核出现棕黄色颗粒作为P73、P53阳性细胞。对切片讲行图像分析。将病理切片放在100倍的显微镜下，观察组织中备抗原的表达情况，然后在400借的显微镜下随机选取3个视野。将每个视野

8、图像摄入计算机，对图像进行裁剪，选定要测量的区域。将图像分割，利用颜色的差异把“热点”图像与周围的背累分开。对分割示的图像进行过滤和提取，然后由计算机对图像进行分析，得出结果。用平均吸光度（AOD）值表示抗原的表达水平，切片阳性表达的强弱与A0D值呈正相关。1.5统计学处理结果应用SPSS13.0ForWindows统计软件包进行分析。口腔癌旁