p53与bcl-2基因产物在口腔黏膜白斑与口腔鳞状细胞癌中的表达研究

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1、p53与bcl-2基因产物在口腔黏膜白斑与口腔鳞状细胞癌中的表达研究【摘要】目的研究p53基因与bcl-2基因产物在口腔黏膜白斑组织(OLK)以及口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达。方法用免疫组化方法检测10例正常口腔黏膜、20例口腔黏膜白斑(OLK)和20例口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中p53与bcl-2基因产物的表达。结果p53在OLK及OSCC中的表达显著高于正常口腔黏膜，差异有显著性(P<0.05)，p53在OSCC中的表达显著高于OLK(P<0.05)。bcl-2在OLK与OSC

2、C中的表达显著高于正常口腔黏膜(P<0.05)，在OLK与OSCC中的表达差异有显著性(P<0.05)。结论p53基因和bcl-2基因的突变，p53蛋白与bcl-2蛋白的过度表达与口腔黏膜白斑癌变密切相关。【关键词】口腔黏膜白斑;鳞状细胞癌;p53;bcl-2　　【Abstract】ObjectiveToobservetheexpressionofp53andbcl-2inoralleukoplakia(OLK)andoralsquamouscellcarcinoma(OSCC).Metho

3、dsTheexpressionofproteinsofp53andbcl-2wereobservedandanalyzedin10normaloralmucosa,20oralleukoplakiaand20oralaquamouscellcarcinomas,bymeansofimmunohistochemicalstainmethods.ResultsTheexpressionofp53inOLKandOSCCshowedthehigherlevelthaninnormaloralmucosa,al

4、sohigherinOSCCthaninOLK(P<0.05).The11expressionofbcl-2inOLKandosccishigherthaninnormaloralmucosa(P<0.05),theexpressionofstainintensityofbcl-2inosccismuchhigherthanOLK,betweenthebothhadstatisticallysignificantdifference(P<0.05).Conclusionp53mutat

5、ionisakeyfactorinthemalignanttransformationoforalleukoplakiaandtheoverexpressionofproteinofbcl-2mayplayanimportantroleinthedevelopmentoforalleakoplakia.　　【Keywords】oralleukoplakia;oralsquamouscellcarcinoma;p53;bcl-2　　口腔黏膜白斑(oralleukoplakia,OLK)是指发生在口腔黏膜上

6、，不能被诊断为其他疾病，以白色损害为主的疾病，是常见的口腔癌前病变，国内外统计约有3%～10%的白斑可以发生癌变，均恶性转化为口腔鳞状细胞癌(oralsquamouscellcarcinoma,OSCC)。细胞恶性转化与细胞凋亡密切相关，而大量的研究均发现bcl-2和p53参与了Bax介导的细胞凋亡的调节机制。本研究采用免疫组织化学方法研究在口腔正常黏膜、白斑和口腔鳞癌组织中bcl-2和p53基因的表达，以了解二者与白斑癌变的相互关系。　　1材料与方法11　　1.1标本来源收集2004年7月—2006年

7、7月天津市口腔医院临床病理标本，其中正常口腔黏膜(normaloralmucosa,NOM)10例，口腔黏膜白斑20例(均为异常增生)，口腔鳞状细胞癌20例(均为高分化)。所有标本均经病理确诊。　　1.2试剂和仪器鼠抗人p53单克隆抗体和bcl-2单克隆抗体均购自美国SantaCruz公司，免疫组化SP试剂盒，DAB显色剂购自美国ZYMED公司，由北京中山生物技术有限公司提供。医用微波炉和Luzex-F图像分析仪(日本日立公司)由天津市口腔医院实验室提供。　　1.3免疫组化染色每个标本连续切片4张，其中

8、一张HE染色，一张作空白对照，另2张分别作p53、bcl-2免疫组化。常规脱蜡至水，行组织抗原微波修复。其余操作按免疫组化SP试剂盒步骤进行。　　1.4结果判定显微镜下观察，p53蛋白以细胞核黄色染色为阳性指标，bcl-2以细胞浆染色为阳性指标。根据阳性细胞比例分为4级：(-)无阳性细胞，(+)阳性细胞<10%，(++)阳性细胞<20%，(+++)阳性细胞>20%。　　染色强度:采用Luzex-F图像分析仪观察细胞染色强度