移植免疫及其免疫检测.ppt

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1、第二十六章移植免疫及其免疫检测移植（transplantation）是指将健康细胞、组织或器官从其原部位移植到自体或异体的一定部位、用以替代或补偿机体所丧失的结构和（或）功能的现代医疗手段。被移植的细胞、组织或器官称移植物（graft），提供移植物的个体称为供体(donor)，接受移植物的个体称为受体（recipient）。自体移植同系移植同种异体移植异种移植原位移植根据移植部位分类异位移植器官移植移植物种类分类支架组织移植细胞移植根据移植物来源分类移植的类型移植名称供者、受者关系举例自体移植同一个体自体皮片移植同系或同基因移植同系或同基因人的单卵双生子间的

2、器官移植的个体间同品系小鼠的皮片移植同种异基因移植同种不同基因人与人之间的肾移植的个体间不同品系小鼠间的皮片移植异种移植异种动物间狗的器官移植给猩猩猪的器官移植给狗移植种类和命名第一节器官移植与移植免疫的特点移植手术后移植物能否存活取决于：1.移植器官在移植过程中活力的保存；2.手术时血管吻合和血液循环重建的质量；3.移植排斥反应的控制。一、器官和组织移植的一般规律1.移植器官或组织的抗原性异物属性2.排斥移植物的记忆特性3.负向免疫调节的必要性二、HLA是诱导排斥反应最强的靶抗原主要组织相容性复合体（majorhistocompatibilitycompl

3、ex,MHC）编码的人类白细胞抗原（humanleukocyteantigen,HLA），是不同个体间进行器官或组织细胞移植时发生排斥反应的主要成分，这种代表个体特异性的同种抗原又称组织相容性抗原(histocompatibility)或移植抗原(transplantationantigen)。HLA是人体多态性最丰富的基因系统。HLA的遗传特征HLA分型要比ABO血型复杂的多，每个人不是从父母分别得到一个基因，而是得到一串基因(HLA单倍型)。每人遗传到二串“冰糖葫芦，其上的“红果”(基因)以A、B、C、D、DR、DQ和DP为序。A有28种红果(分别记为A

4、1、、A2、A3、A9...)，B有61种(记为B5、B7、B8、B12...)，DR有24种(记为DR1、DR2、DR3、DR4...)等。七彩红果共有164种编号，如不同遗传排列的红果随机组合，按理论推算，“冰糖葫芦”有五亿多种变化，能组合33亿多种HLA分型。理论推测的HLA分型数量巨大，但对一个具体的民族来说并非如此。在三类HLA分子中，Ⅰ、Ⅱ类分子是触发移植排斥反应的首要抗原，尤其是HLA-DR位点的抗原分子HLA的识别方式：直接识别间接识别HLA发挥双重作用：介导宿主抗移植物反应(HVGR);参与移植物抗宿主反应(GVHR)。第二节HLA配型与应

5、用分析HLA分型方法的改进和不断完善，使得HLA复杂的多态性更加显现，亦推动了HLA与群体及自然选择关系的研究，更促进了人们对疾病本质的认识。一、HLA配型（一）血清学分型法应用一系列已知抗HLA的特异性标准分型血清与待测淋巴细胞混合，借助补体的生物学作用介导细胞裂解的细胞毒试验。耗时长不同批号抗血清结果常有不同操作简便易行节约试剂、结果可靠、重复性好无需特殊设备优点缺点用于HLA分型的微量细胞毒试验死（着染）细胞（%）记分结果判断0～101阴性11～202可疑阴性21～504弱阳性51～806阳性>808强阳性0未试验或不能读数微量细胞毒试验判定标准（二）

6、细胞学分型法以混合淋巴细胞培养（mixedlymphocyteculture,MLC）或称混合淋巴细胞反应（mixedlymphocytereaction,MLR）为基本技术的HLA分型法。能用本法测定的抗原称为LD抗原（lymphocytedefinedantigen）,包括HLA-D、-DP。MLC分为单向MLC和双向MLC将已知HLA型别的分型细胞用丝裂霉素C或X线照射预处理，使其失去增殖能力仅作为刺激细胞；而以具有增殖能力的受检者外周血单个核细胞为反应细胞。两者混合培养时，反应细胞可对刺激细胞发生应答而增殖，用3H-TdR掺入法测定细胞增殖强度，从而

7、判断受检细胞的HLA型别。根据选用的刺激细胞类型分为：1．阴性分型法2．阳性分型法1.单向MLC遗传型不同的两个个体淋巴细胞在体外混合培养时，由于两者HLA不同，能相互刺激导致对方淋巴细胞增殖，故称双向MLC。在此试验中，各自的淋巴细胞既是刺激细胞，又是反应细胞，反应后形态上呈现的细胞转化和分裂现象，可通过形态法计数转化细胞。2.双向MLC本法不能判断型别，只能说明供、受体HLA抗原配合程度（三）分子生物学分型法分子生物学技术的迅速发展，使得HLA的DNA分型技术应运而生，并在开展DNA限制性片段长度多态性分析、DNA指纹图、等位基因特异性寡核苷酸杂交等基础

8、上，引入多聚酶链反应技术，使HLA分型得以在更精密的