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1、藻种培养注意的事项一、藻种的两种培养类型一燉來说藻种的培养有两种方式：一种是长期保存所需要的培养方法,一种是以实验为日的，短期内保藏藻种的培养方法。长期培养垠主要的问题是选择一种合适的培养基，可以在3个月到一年的时间内连续培养藻种。故适合长期培养藻种的培养基是agar（
2、A1体琼脂培养基），但是使用殆虹冇一个弊端，即培养物保持无菌的问题：我们可以加一层蒸懾水（咸水的藻类可以加灭菌过人工的海水）在agar.］：,这种做法可以保证在氏期保种的过程屮减少agar水分和营养的流失。长期保种使用的培养基，不要选择背养过于丰富的，因为多数的藻,尤其是丝状藻,在营养半富的
3、环境生长,会发生形态结构上的变化，如果要做生理生态方面研究,实验材料的形态结构是不能异常的。适合长期保种的贫背养的培养基有这些：Bold's基础培养基，以及该培养基加匕蛋口丿冻或者琼脂制成的“gar,适合K期培养绿藻；Allen及其改良后的配方可以长期培养一燉常见的蓝藻和绿藻：土水培养基和它的…个改良的系列也实用培养多数凝种。对于我库提供的涼种，山于藻种长期习惯的原因，建议使用我们提供的原配方來培养,在长期培养的时候,可以适当稀释原培养基，在凝种培养过程屮，生长速率会变慢,可以保持其形态结构不变。另外，长期培养的时候,除了选择适当的培养基，还可以降低温度5〜
4、8。C（降温的过程最好能循序渐进,突然改变环境温度,可能会导致藻种不适应和死亡〉。光照强度可以减小为原先的一半。在实验之前3到4周，将长期培养的藻种接种到我们提供的培养基屮（培养基必须灭菌），按照我们给予的培养条件培养,在实验前6天左右，再次接种。短期培养则可以直接按照我们提供的培养基和培养条件培养。山于试验的需要，常常要求在短期时间内获得大杲的培养物，我们可以采用通气培养和摇床培养。通气培养可以通C02或洁净的空气，视培养物的多少來决定通气泵的大小，在通气的硅胶管屮设置一个缓冲瓶，塞上灭菌后的脱脂棉，帮助净化空气，如果对通气有更高的要求，可以在通气管屮加上
5、一层滤膜。使用摇床培养,需要注意藻种的生理周期。二、培养基1、BG11是我库培养蓝藻使用最广泛的培养基。除了极少部分蓝藻，大部分都使用BGllo按照我们给的配方配制好后高压灭菌,BGU经常会产生絮状沉淀。这是因为其中有Cd+和C032-,我们可以在灭菌后再超净台上用灭菌过的注射器來加两者之屮的另外一种。通常我们建议将氯化钙的母液单独灭菌后在无菌宅保存,在配置好BG11的工作液并灭菌之后，在超净台上用注射器将氯华钙加入。2、SE是我库用來培养常见的绿藻所使用的培养基。一般來说,如果配制了母液，用母液來配培养基，灭菌后是不会产生沉淀的。配置的时候注意先将所需要的
6、蒸馆水准备好,将爲要的药品逐个加入，等到一种药品充分溶解之后再加入第二种。另外，土水在蒸馆过滤后,是不需要灭菌的，因为高压灭菌的过程会让其中的一些营养成分损失。3、水是培养基成分屮很垂要的-“个方面。配培养基，可以取蒸谓水、自來水、去离子水,也可以取藻种采集地的水。使用经过处理的水，如双蒸水、去离子水，有时候并不合适培养，因为仪•器在处理过程屮会帯入微最的令毒物质。采集藻种采集地的水來培养是最理想的，但是需要经过一些处理，处理的于段和过程要尽可能保持其行养成分不变。如果是咸水或者海水的藻类采集地采集的水，应将其置于5。C的黑暗屮，保持6个月。如果是泉水或者湖
7、水等淡水的水源，水样置于20°C的室温，立即通过活性炭方法处理：毎升水加2g活性炭，搅拌一小时后，过滤，并重复此过程3〜4次。4、咸水和微咸水的藻类需要的人工咸水的合成效果关键在于如何蒸他;还有…些水华蓝録难以培养，主要原因是因为在野外生长时，通常底泥提供的营养元索可以溶在水中，但是在实验室培养，经过高压灭菌，很多营养都损失了。所以我们建议不用髙压灭菌法，使用巴斯徳（gsteur）灭菌方法：加热到73〜78°C,保持15〜20分钟，间隔24小时灭菌一次，一共三次。5、配制培养基的时候…吐经过高压灭菌成分会发生改变的微量元索，丿应在灭菌后在超挣台上用灭菌的注射
8、器添加。如维生索，但是维生索的灭菌也必须很严格,往往藻种污染到细菌都址因为维生索引起的，可以使用0.22曲或0.45曲的滤膜來过滤维生索溶液。三、灭菌灭菌在藻种的培养中，是十分朿要的一个环节。藻种培养、转接、培养基制备等等，任何一个坏节都必须使用灭菌的器械，否则藻种都会染菌，甚至染上其它的藻类。所有的培养藻种所需要的二幷瓶、试管、培养IIIL等一切玻璃器1111■都必须经过高压灭菌，配制培养基所需要的移液管、用来装培养基所需要的瓶也必须经过灭菌，转接藻种需要的滴管、接种环、涂布所需要的玻璃棒、培养川L等都必须灭菌。培养所需要的三角瓶、试管、培养川L,灭菌前洗
9、净，三角瓶可以用牛皮纸内衬粗滤纸來包住瓶I」，用棉线
