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1、芽抱杆菌常用培养基配方（按理说，该实验的所有培养基都在这了,后红字更为清楚些。OO摘自百度）肉汤琼脂培养基：蛋白BlOg,牛肉膏15g,NACL15g,蒸馆水1000ml,琼脂18go调节PH7.2,0.lMPA20min灭菌。如果用液体做培养基，则去掉琼脂即可。100mL/组，其中20mL液体培养基/250mL△中（内装玻璃珠10颗）；50mL固体斜面培养基分装在试管中：5mL/支，10支。2、或是（J-琼脂培养基：胰蛋白腺5g,酵母膏15g,磷酸^■1氢二钾3爲葡萄糖2爲琼脂20各蒸憎水1000ml。调节PH7.3—7.5Mpa30min灭菌。
2、）过氧化氢酶测定1、试剂:3-10%过氧化氢2、3、接种与培养：一般将测试菌种接种于肉汤琼脂斜面上，30度下培养1-2天。试验方法：取一干净载玻片，在上面加一滴3-10%的双氧水,挑取1环1-2天的的菌苔，在双氧水溶液中涂抹，如有气泡出现（02）,作为过氧化氢酶阳性，无泡为阴性。也可以将过氧化氢液直接加入斜面上，观察气泡的产生。三、需氧性测定1、培养基：酪素水解物20g,葡萄糖2、四、1、培养基10g,,NACL5g,H0CH2S03Nalg,HSCH2C00Na2g,琼脂15g,蒸馆水lLo调节PH7.2,分装试管，0・06Mpa,30min灭菌
3、，培养基不摆斜面。接种与观察：用一小环的肉汤菌液，穿刺接种到上述培养基中（穿刺管底），一般与30度培养3-7天观察结果。若芽抱杆在琼脂柱表面生长为好氧菌，沿穿刺线生长则为厌氧菌。酪素水解（用于检测不同种类的芽范杆菌是否具有分解酪素的特点）(1)(2)脱脂牛奶制备取新鲜牛奶，煮沸后去掉上层油脂，再经离心脱脂（3000r/min,lOmin），除去上层油脂，即为脱脂牛奶。牛奶平板的制备取50ml的脱脂牛奶放入一只三角瓶中，另外称L5g琼脂置于含有50ml蒸馅水的另外3只三角瓶中，然后将两液分开灭菌，0.06Mpa-20mirb带冷至45-50摄氏度时,
4、速将两液混匀倒平板，即为牛奶平板。将平板倒置过夜，使表面水分干燥。2、接种与观察将测试菌种以三点法点接在牛奶平板上，一般于30度培养1,3,5,7和14天，如菌落周培养基1.1可溶性淀粉3g/L蛋白月东10g/L酵母膏3g/LKH2P041.5g/LK2HP042g/LMgS040.Ig/LPH7.4-7.6（富集用）1.2肉汤（NA）培养基（营养琼脂）:蛋白K10g/L牛肉膏3-5g/LXaC15g/LPH7.2-7.4（保存计数或分离纯化用）営养琼脂：麦芽汁培养基习：］混合使用，菌落不易扩散，形态特征典型1・3蛋白月东10g/L酵母膏5g/L葡
5、萄糖3.5g/LXaC15g/LK2HP040.5g/LMgSO43g/LMnS0425mg/LPII7.2-7.4（分离纯化用）1.4产淀粉篦菌株筛选培养基:可溶性淀粉3-5g/L蛋白豚10g/L牛肉膏3-5g/LNaCl5g/LPH7.2—7.4（用于淀粉酶产生菌分离筛选）1・5产蛋白酶菌株筛选培养基1・5.1酪素培养基:★★2.1.5.1.1葡萄糖lg/L,酵母膏lg/L,酪素4-5g/L,K2HP04lg/L,KH2P040.5g/L,MgS040.lg/L蒸谓水1000ml,pH7.0-7.2O另：葡萄糖0・5g/L,酪素lOg/L,Na
6、Cl5g/LK2HP040.5g/L,KH2P040.5g/L,琼脂20g/LpH7.2-7.42.1.5.1.2牛肉膏3g/L或酵毋浸粉5g/L酪素lOg/LNaCl4-5g/LPH7.2-7.4先将酪素用少量2%氢氧化钠润湿，玻棒搅动，再加适量的蒸憎水，在沸水浴中加热搅拌至完全溶解（10-15min）,补足lOOOmL蒸懈水，加入其他成分，调PH分装灭菌。2.1.5.1.3酵田膏0.05g/L酪素4g/LKII2P040.36g/LNa2HP041.lg/LMgS040.5g/LNaCl0.16g/LFeSO,0.002g/LCaCl20.00
7、2g/LZnCl20.014g/LpH6.5-7.04%酪素母液制备：4g酪素溶解于0.IX的30-35mL的氢氧化钠溶液中，水浴溶解20min,溶解完毕后加入60-70C热水定溶到100mL.200mL培养基加20mL.★★2・1・5・2脫脂奶培养基：牛肉膏3g/L（酵母浸粉5g/L）蛋白K10g/LNaC15g/L脱脂奶粉10-12g/L,PH7.2（用于蛋白酶产生菌的筛选）将脱脂奶（粉）加水溶解制成10%溶液，于115CJD热灭菌20-30min,与牛膏蛋白月东固体培养基1:9混合均匀倒平板。2.1.6纤维素产生菌培养基：CMC-Na2g/L
8、蛋白®10g/L酵母膏5g/LNaC15g/LPH7.2-7.4（用于纤维素产生菌的筛选）2-1.7促芽胞形成培养基：土壤
