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1、XX大学毕业论文骨巨细胞瘤组织中VEGF和MMP2表达及意义2014年6月25日骨巨细胞瘤组织中VEGF和MMP2表达及意义【摘要】H的：研究VEGF和MMP2在骨巨细胞瘤(GCT)组织中的表达情况及其与GCT血管生成和增殖状态的关系，并分析各种因素在GCT预后屮的作用•方法：采用SP法检测85例患者标VEGF,MMP2,PCNA,CD34表达，分析其与GCT转移、复发的关系，并采用Cox回归模型分析GCT复发的影响因索.结果：85例GCT患者屮VEGF,MMP2的阳性表达率分别为62.4%和56.
2、5%,增殖指数(PI)值为(52.0±21・5)%,微血管密度(MVD)值为(33.4±9.6)条.不同VEGF表达组间PT均值,MVD均值差异有统计学意义(P0.01).不同MMP2表达组间MVD均值差异有统计学意义(P0.01).不同VEGF表达组，不同MMP2表达组比较，其转移率、复发率差异有统计学意义(P0.01).MVD值在有无转移组、有无复发组之间差片有统计学意义(P0.01).PI值有无复发组之间差异有统计学意义(P0.05).多因索Cox冋归分析显示，VEGF(RR=6.056),M
3、MP2(RR=5.387),MVD(RR=3.121)是影响GCT复发的危险因素；与常规刮除术相比，广泛完整切除术(RR=0.176)是影响GCT复发的保护因素.结论：VEGF,MMP2表达与骨巨细胞瘤的血管生成、细胞增殖及复发有关，可作为判定骨巨细胞瘤预后的参考指标.【关键词】巨细胞瘤骨内皮生长因子基质金属蛋白稱类免疫组织化学0引言骨巨细胞瘤(GCT)是一种具侵袭性、潜在恶性的骨肿瘤，复发率较高,其发病率在我国远高于欧美国家.GCT因其细胞成分复杂，生物学行为多变，导致Jaffe的组织病理学分级、
4、Campanacci的X线分度以及Enneking的外科分期均不能很好地反映其生物学行为.近年来，国内外很多学者通过检测肿瘤组织屮特定基因和蛋白产物表达，力求找寻可靠而有效的指标来预测肿瘤的复发，指导临床治疗[1]•我们应用免疫组化技术检测人骨巨细胞瘤屮血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达，探讨其与肿瘤微血管密度(MVD)、增殖指数(PI)的关系，及其对人骨巨细胞瘤转移、复发的影响.1对象和方法1.1对象我院骨外科1995/2006年接受手术切除的GCT患者85(男48,
5、女37)例；年龄20〜54(平均33)岁.随访时间为13〜108(平均40.1)mo.复发组30例，无复发组55例；转移组11例，无转移组74例.1.2方法肿瘤组织用40g/L的甲醛固定，石蜡包埋，4
6、im连续切片，采用SP法进行免疫组化染色.鼠抗人VEGF,MMP2,增殖细胞核抗原(PCNA)及CD34mAb,SP试剂盒均为SantaCruz公司提供.染色步骤按照说明书进行.以磷酸盐缓冲液代替一抗做阴性对照.以细胞质出现黄色或棕黄色颗粒为VEGF阳性细胞，以细胞质岀现黄色或棕黄色颗粒判为MMP2阳
7、性细胞，参照文献［2］的方法，计数肿瘤细胞阳性细胞数并结合染色强度进行染色结果评分.①染色强度评分：阴性为0分，弱阳性为1分，阳性为2分，强阳性为3分；②阳性细胞百分数评分：0%的阳性细胞数为0分，25%的阳性细胞数为1分，25%〜50%的阳性细胞数为2分，50%的阳性细胞数为3分.①为最终评分：总分0〜1分为(・)，2〜3分为什)，4〜5分为(),6分为().PCNA阳性细胞为核着色，计数1000个细胞屮PCNA阳性细胞数，以PI值表示肿瘤细胞增殖情况：PI=(阳性细胞数/1000)xl00%・另
8、CD34阳性判断以细胞质和胞膜出现棕褐色颗粒为阳性.按文献［2］的方法进行MVD记数.统计学处理:采用SPSS13.0进行，计量资料两组间比较采用t检验，计数资料组间比较采用%2检验，预后分析采用Cox回归.P0.05为差异有统计学意义.2结果2.1VEGF和MMP2在骨巨细胞屮的表达85例骨巨细胞瘤屮VEGF和MMP2的阳性表达率分别为62.35%和56.47%.VEGF呈胞质着色，以多核巨细胞多见，强阳性染色的瘤细胞多位于浸润边缘或细胞活跃增生区；MMP2呈胞质着色，多核巨细胞及单核基质细胞均有
9、表达.85例病例均有PCNA表达，PI值为(52.0±21.5)%.CD34主要表达于血管内皮细胞，全部病例的MVD值为(33.4±9.6)条.2.2VEGF,MMP2与PI,MVD关系VEGF阳性组与阴性组间PI均值、MVD均值差异有统计学意义(t=2.817,P=0.006；t=5.824,P=0.000).MMP2阳性组与阴性组间MVD均值差异有统计学意义(t=4.962,P-0.000),而两组PI均值差异无统计学意义(P0.05,表1).表1VEGF,MMP
