鲜乳中抗生素的检验.ppt

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1、鲜乳中抗生素残留量的检验牛奶中抗生素残留的来源一般认为，对泌乳牛用药不当或不注意安全时间是牛乳中抗生素残留的重要因素，尤其是使用乳房灌注法治疗乳腺炎时，易造成牛乳中抗生素残留。在牛饲料中添加饲料添加剂已十分普遍，其中含有一定比例的抗生素，主要作用是预防疾病，这是牛奶抗生素残留的重要原因。鲜乳中抗生素残留量检验程序TTC法，即氯化三苯基四氮唑法(tripheyetetrazoliumchloride)，是目前我国食品卫生标准中规定的检查牛乳中抗生素残留的检测方法(GB5409—85)。该法简便、快速，无需特殊设备，3～4h可见报告，很适合牧场、乳品厂及食品卫生检测部门采用。

2、TTC检测法检验所需器材菌种、培养基和试剂菌种:嗜热乳酸链球菌。脱脂乳:经113℃灭菌20min。4%2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)水溶液:称取1gTTC,溶于5mL灭菌蒸馏水中,装褐色瓶内于7℃冰箱保存,临用时用灭菌蒸馏水稀释至5倍。如遇溶液变为玉色或淡褐色,则不能再用。仪器水浴锅、培养箱、不锈钢锅、温度计、蜡笔、试管架、1ml和10ml的灭菌吸管、灭菌试管TTC检测法操作步骤菌液制备:将菌种移种脱脂乳,经36±1℃培养15h后,以灭菌脱脂乳1:1稀释待用。检验：取检样9mL,置15mm×150mm试管内,80℃水浴加热5min冷却37℃以下,加菌液1mL,3

3、6±1℃水浴培养2h,加TTC0.3mL,36±1℃水浴培养30min,观察如为阳性,再于水浴中培养30min作第二次观察,每份检样作二份,另外再作阴性和阳性对照各一份,阳性对照管用无抗生素的乳8mL加抗生素及菌液和TTC。阴性对照管用无抗生素乳9mL加菌液和TTC。判断方法：准确培养30min观察结果,如为阳性,再继续培养30min作第二次观察。观察时要迅速,避免光照过久发生干扰。乳中有抗生素存在,则检样中虽加菌液培养物,但因细菌的繁殖受到抑制,因此指示剂TTC不还原,不显色。与此相反,如果没有抗生素存在,则加入菌液即行增殖,TTC被还原而显红色,也就是说检样呈乳的原色

4、时为阳性,呈红色为阴性，见表1，检测各种抗生素的灵敏度见表2。表1显色状态判断标准显色状态判断未显色者阳性徽红色者可疑桃红色至红色者阴性表2检测各种抗生素的灵敏度抗生素名称最低检出量青霉素0.004单位链雹素0.5单位庆大霉素0.4单位卡那霉素5单位注意事项1、配制培养基应注意的问题2、嗜热链球菌的保存谢谢观赏