实验1-植物组织中自由水和束缚水含量的测定.ppt

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1、实验1植物组织中自由水和束缚水含量的测定一实验目的1、了解和掌握自由水和束缚水测定的原理和意义及测定的方法2、熟悉阿贝折射仪的使用二、实验原理自由水—未被细胞原生质胶体颗粒吸附而可以自由移动、蒸发和结冰，也可以作为溶剂。束缚水—被细胞原生质胶体颗粒吸附而不易移动，因而不易被夺取，也不能作为溶剂。依据水势差而移动的原理，将植物组织浸入高浓度（低水势）的糖溶液中一定时间后，自由水可全部扩散到糖液中，组织中便留下束缚水。自由水扩散到糖液后（相当于增加了溶液中溶剂）便增加了糖液的重量，同时降低了糖液的浓度。测定此降低了的糖液的浓度，再根据原先已知的高浓度糖液的浓度及重量，可求出浓度降低了的

2、糖液的重量。用浓度降低了的糖液的重量减去原来高浓度糖液的重量即为植物组织中的自由水的量（即扩散到高浓度糖液中的水的量）。最后，用同样的植物组织的总含水量减去此自由水的含量即是植物组织中束缚水的含量。三、实验器材1、材料：新鲜的植物叶片（阴生、阳生）2、仪器：阿贝折射仪；烘箱。3、试剂：重量百分浓度为60％的蔗糖溶液；用托盘天平称取蔗糖60～65g，置烧杯中，加蒸馏水40～35g，使溶液总重量为100g，溶解后备用。四、实验步骤1.植物组织中总含水量的测定（1）取称量瓶1只，准确称重。（2）在田间选取生长一致的待测的植物数株，各选部位、长势、叶龄一致的有代表性叶子数片。用打孔器钻取小

3、圆片150片（注意避开粗大的叶脉），立即装到上述称量瓶中（每瓶随机装入50片），盖紧瓶盖并精确称重。（3）将称量瓶连同小圆片置烘箱中105℃下烘15min以杀死植物组织细胞，再于80～90℃下烘至恒重（称重时须置干燥器中，待冷却后称）。设称量瓶重量为W1，称量瓶与小圆片的重量为W2，称量瓶与烘干的小圆片的重量为W3（以上重量单位均设为g，下同）。则植物组织的总含水量（％）可按下式计算植物组织的总含水量（％）＝（W2－W3）/（W2－W1）×100根据上式可求出组织总含水量的值。2.植物组织中自由水含量的测定（1）另取称量瓶1只，准确称重。（2）用打孔器打取小叶圆片30片（植物材料的

4、选取同上），立即随机装入称量瓶中盖紧瓶盖并立即称重。（3）称量瓶中各加入60％的蔗糖溶液5ml左右，再准确称重。（4）各瓶于暗处置4～6h（经减压处理后，只需在暗处置1h），其间不时轻轻摇动。到预定的时间后，充分摇动溶液。用阿贝折射仪（见附注）测定瓶中糖液浓度，同时测定原来的糖液浓度。设称量瓶重量为W1，称量瓶与小圆片的重量为W2，称量瓶与小圆片及糖液的重量为W4，糖液原来的浓度为C1，浸过植物组织后的糖液的浓度为C2。则植物组织中自由水的含量（％）可由下式算出：植物组织中自由水的含量（％）＝（W4－W2）×（C1－C2）/[(W2－W1)×C2]×100根据上式同样可求出三个不同

5、的测定值并进一步求出其平均值。3.植物组织中束缚水含量的计算植物组织中束缚水的含量（％）＝组织总含水量（％）－组织中自由水含量（％）（二）称重法1、取称量瓶2只，编号2、取完整叶片避开主脉，用打孔器取30片，立即称重后放入称量瓶。3、每个称量瓶加入植物组织质量6倍的65%的蔗糖溶液4、各称量瓶置于暗处4-6小时，期间不断摇动。5、将叶片取出，用湿纱布或滤纸吸去表面糖液，立即称重植物组织中的自由水含量（%）=（（浸泡前叶片质量—浸泡后叶片质量）/浸泡前叶片质量）*100植物组织中束缚水的含量（％）＝组织总含水量（％）－组织中自由水含量（％）五实验作业1、束缚水含量为什么与植物的抗性有

6、关？2、讨论同一植物在不同外界环境条件下的相对含水量有何特点？