植物组织中丙二醛含量的测定实验报告

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1、为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划植物组织中丙二醛含量的测定实验报告　　植物组织中丙二醛含量的测定　　一、原理　　植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛(malondialdehydeMDA)是膜脂过氧化作用的产物之一，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。　　丙二醛在酸性和高温条件，可以与硫代巴比妥酸(TBA)反应,形成在532nm波长处有最大光吸收的有色三甲基复合物，该复合物的吸光系数为155????????/(??·????)，并且在600nm处有最小光吸收。可

2、按公式：　　??532－??600=×??×??①　　算出MDA浓度??(????????/??)，进一步算出单位质量组织中MDA含量(????????/??)。式中A532和A600分别表示532nm和600nm处的吸光度值。??为比色杯厚度(????)。　　需要指出的是，植物组织中糖类物质对MDA-TBA反应有干扰作用。为消除这种干扰，经试验，可用下列公式消除由蔗糖引起的误差。　　??(????????/??)=(??532－??600)???450②　　式中：A450、A532和A600分别表示450nm、532nm和600nm波长下的吸光度值。用公式②算出植物

3、样品提取液中MDA的浓度后，进一步算出其在植物组织中的含量。目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　二、实验材料、试剂与仪器设备　　实验材料　　海滨锦葵叶片。　　试剂　　1、5%三氯乙酸(TCA)。　　2、%硫代巴比妥酸(TBA)溶液：称取硫代巴比妥酸溶于10％TCA溶解并用其定容至l00mL。　　仪器设备　　研钵，恒温水浴锅，分光光度计，冷冻离心机，天平，刻度试管，可

4、调加样器　　三、实验步骤　　的提取：称取植物材料，剪碎，加入5%TCA5mL，研磨至匀浆，匀浆在3000r/min离心10min，上清液为样品提取液。　　2.显色反应和测定：吸取离心的上清液2mL，加入2%TBA溶液，摇匀。将试管放入沸水浴中煮沸10min(自试管内溶液中出现小气泡开始计时)，取出试管并冷却，3000r/min再离心15min。　　3．取上清液并量其体积。以％TBA溶液为空白测定532nm、600nm和450nm处的吸光　　度值，并按公式②算出MDA浓度。　　注意：目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的

5、专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　1．可溶性糖与TBA显色反应的产物在532nm也有吸收，当植物处于干旱、高温、低温等逆境时可溶性糖含量会增高，必要时要排除可溶性糖的干扰。　　2．低浓度的铁离子能增强MDA与TBA的显色反应，当植物组织中铁离子浓度过低时应补充Fe3+　　3．如待测液浑浊，可适当增加离心力及时间，最好使用低温离心机离心。　　实验七植物组织中丙二醛含量的测定　　一、实验目的　　植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二

6、醛是膜脂过氧化的最终分解产物，从膜上产生的位置释放出后，与蛋白质、核酸起反应修饰其特征；使纤维素分子间的桥键松驰，或抑制蛋白质的合成。MDA的积累可能对膜和细胞造成一定的伤害。　　二、实验原理目的-通过该培训员工可对保安行业有初步了解，并感受到安保行业的发展的巨大潜力，可提升其的专业水平，并确保其在这个行业的安全感。为了适应公司新战略的发展，保障停车场安保新项目的正常、顺利开展，特制定安保从业人员的业务技能及个人素质的培训计划　　丙二醛是常用的膜脂过氧化指标，在酸性和高温度条件下，可以与硫代巴比妥酸反应生成红棕色的三甲川，其最大吸收波长在532nm。但是测定植物组织中

7、MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与TBA显色反应产物的最大吸收波长在450nm，532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中MDA—TBA反应物质含量时一定要排除可溶性糖的干扰。低浓度的铁离子能够显著增加TBA与蔗糖或MDA显色反应物在532、450nm处的消光度值，所以在蔗糖、MDA与TBA显色反应中需一定量的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100～300μg/gDW，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe的终浓度为μmol/L。　　A.直线回归法　　MDA与TBA显色反应产物在