德宏州1608例女性hpv感染基因分型情况调查

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1、德宏州1608例女性HPV感染基因分型情况调查  [摘要]目的了解德宏地区女性宫颈感染高危人乳头瘤病毒(HPV)基因型的分布情况。方法采用PCR和分子杂交技术对1608例就诊女性进行HPV基因分型检测。结果1608例女性中HPV阳性651例,感染率为40.48%;其中HPV低危型感染71例,高危型感染580例,排在前5位的HPV高危基因型依次是HPV16(23.35%)、HPV58(15.36%)、HPV52(9.37%)、HPV33(7.22%)和HPV18(4.61%)。HPV高危基因型单一感染462例(70.97%),二重感

2、染95例(14.59%),三重感染22例(3.38%)。在651例感染者中,HPV16单一感染152例,HPV16合并其他基因型双重和三重感染67例。感染年龄高峰在30~50岁。结论1608例筛查女性中,HPV感染率较高,达40.49%,以HPV16基因型为主。HPV分型检测对高危年龄段女性健康检查、预测病变进展、评估预后、指导治疗有重要价值。[关键词]人乳头瘤病毒;基因分型;PCR和分子杂交技术[中图分类号]R737.33[文献标识码]A[文章编号]1674-4721(2013)10(b)-0161-03人乳头瘤病毒(human

3、papilloma6virus,HPV)是一组形态和基因结构相似,但致瘤表现不同的病毒,能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖,可引起人类上皮的良性和恶性肿瘤。不同HPV基因型的感染与女性宫颈疾病的发生、发展、转归有着不同程度的相关性[1],特异性的HPV检测方法对预防和诊断HPV感染引起的相关疾病,特别是女性生殖道肿瘤的早期发现具有重要意义。本文采用PCR和分子杂交技术对本院妇科就诊的1608例疑似HPV感染的女性进行HPV基因分型检测,分析德宏州妇女HPV感染情况,现报道如下。1材料与方法1.1研究对象2010年11月~2011年1

4、2月到本院妇科就诊的女性1608例,年龄17~76岁。1.2仪器与试剂PCR扩增仪;分子杂交仪;HPV基因分型检测试剂盒(深圳亚能生物技术有限公司提供)。1.3实验方法1.3.1样本收集实验样本由妇科医生采集,使用专用的宫颈刷采取宫颈口上皮细胞样本,放入装有专用细胞保存液的洗脱管中,沿刷柄折痕处将宫颈刷柄折断,旋紧管盖,作好标记送实验室检测。1.3.2样本处理按试剂盒说明书进行处理:将洗脱管中的宫颈刷充分漂洗,涡旋震荡16min,以带有相应试剂的1.5ml微量离心管收集全部洗脱液,13000r/min离心10min,弃上清液获得管

5、底的沉淀细胞块。在离心管中加入50μl裂解液,充分混匀,悬浮细胞沉淀,水浴煮沸10min,13000r/min离心10min,保留上清待用。1.3.3检测方法按试剂盒说明书进行实验:检测步骤主要包括HPV病毒DNA提取→PCR扩增→膜杂交→洗膜显色及结果判读。检测的23种基因型包括18种高危型(HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、83和MM4型)和5种低危型(HPV6、11、42、43、44)。1.4统计学处理计算HPV不同基因型的感染率。2结果2.11608例HP

6、V基因分型的检测结果61608例标本中共筛查出HPV阳性标本651例,阳性率为40.48%。651例HPV阳性标本中高危型580例(包括双重及多重感染118例),占89.09%;低危型71例(包括2例双重感染),占10.91%;另外51例低危型合并高危型多重感染。580例高危型中前5位的依次是HPV16(23.35%)、HPV58(15.36%)、HPV52(9.37%)、HPV33(7.22%)和HPV18(4.61%)。HPV高危基因型单一感染462例(70.97%),二重感染95例(14.59%),三重感染22例(3.38%

7、),四重感染1例(0.15%)。在651例感染者中,HPV16单一感染152例,HPV16合并其他基因型双重和三重感染67例。见表1、图1。2.2年龄分组的检测结果本实验将筛查女性分为6个年龄段进行分析,≤20岁、21岁~、31岁~、41岁~、51岁~、>60岁。各年龄组HPV感染阳性率分别为0.56%、8.15%、17.16%、10.88%、3.30%、0.44%(表2、图2)。3讨论HPV是一种具有种属特异性的嗜上皮病毒,属双链闭环的小DNA病毒,包含约8000个碱基对,其中包括8个早期开放读码框架(E1~E8)、2个晚期读码

8、框架和1个非编码长控区,它由蛋白衣壳外衣和被包裹着的核心构成,核心是能引起人类疾病的无包膜小型双链环状DNA。根据HPV基因序列结构的不同,人们将HPV分为近130种基因型,其中近百种的基因序列已被摸清。人类是HPV的唯一宿主,在普通人群中HPV感

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