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《流产布鲁氏菌bp26和omp10基因的同源性分析_王军.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中国兽医科学2011,41(01):25-30ChineseVeterinaryScience中图分类号:S852.614文献标志码:A文章编号:1673-4696(2011)01-0025-06流产布鲁氏菌bp26和omp10基因的同源性分析王军1,王瑞2,申之义2,杨莲茹2(1.内蒙古大学生命科学学院,内蒙古呼和浩特010021;2.内蒙古农业大学兽医学院,内蒙古呼和浩特010018)摘要:利用布鲁氏菌外膜蛋白bp26基因和omp10基因,对分离的布鲁氏菌和参考布鲁氏菌菌株进行克隆和序列分析,以明确分离的布鲁氏菌和参考布鲁氏菌菌株与基因库中的布鲁氏菌外膜蛋白
2、bp26基因和omp10基因间的同源性。根据GenBank中的布鲁氏菌bp26基因和omp10基因,分别设计合成了1对特异性引物,以提取的分离株布鲁氏菌和2株参考布鲁氏菌的总DNA为模板,通过PCR技术扩增得到了bp26基因和omp10基因,回收纯化后将这2个基因分别连接到pMD18-T载体上,热激发转化受体菌大肠杆菌DH5α,并进行质粒提取、PCR鉴定和测序。结果表明,bp26基因全长为995bp,包含1个由753bp的核苷酸组成的完整开放阅读框,分离菌株的同源性为100%,与参考菌株M5、S2的同源性分别为100%和99.9%,与参考序列S19、870的同源
3、性分别为99.9%和100%;omp10基因全长531bp,包含1个由396bp的核苷酸组成的完整开放阅读框,分离菌株的同源性为100%,与参考菌株M5、S2的同源性均为100%,与参考序列544的同源性为99.7%。证实bp26基因和omp10基因在各种型间的同源性都在99%以上,表明这2个基因在布鲁氏菌属的细菌中是高度保守的。关键词:布鲁氏菌;bp26基因;omp10基因;同源性;分析Identityanalysisofbp26andomp10genesofBrucellaabortus1,WANGRui2,SHENZhi-yi2,YANGLian-ru2W
4、ANGJun(1.CollegeofLifeScience,InnerMongoliaUniversity,Hohhot010021,China;2.CollegeofVeterinaryMedicine,InnerMongoliaAgriculturalUniversity,Hohhot010018,China)Abstract:TheaimofthepresentstudywastoanalyzetheidentityofgenescodingforBrucellaoutermembraneproteinsBP26andOMP10amongBrucellao
5、ftestingorreferencestrainsandGenBankstrains.TwopairsofprimersspecifictoBrucellabp26andomp10genesweredesignedandsynthesizedaccordingtoGenBanksequences,respectively.bp26andomp10geneswereamplifiedbyPCRfromthegenomicDNAsextractedfromtestingor2referenceBrucellastrains.ThePCRproductswerecl
6、onedintothepMD18-Tvectorandsequenced,respectively.TheconstructedplasmidsweretransformedintoEscherichiacoliDH5α.TheextractedplasmidDNAwereconfirmedbyPCRandsequencing.Sequencingresultsshowedthatthebp26genewas995bpinlengthcontainingacomplete753bpopenreadingframe(ORF).Sequencecomparisonr
7、evealedthattheidentityofbp26genesinthetestingstrainswas100%,andthetestingandthereferenceM5orS2strainswas100%or99.9%,andthetestingstrainsandthereferenceS19or870se-quenceswas99.9%or100%.Theomp10genewas531bpinlengthcontainingacomplete396bpORF.Theidentityofomp10geneamongthetestingstrains
8、was100%,thet
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