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1、356ActaNutrimentaSinica,Sep.1998,Vol20No.3茶抗龋的动物模型1曹进陈罕赵燕刘箭卫沈乃(湖南医科大学,茶与健康研究室,长沙410078)提要方法:用变形链球菌Ingbritt在Wistar大鼠上复制出龋齿动物模型,以0.021mmol/L氟化钠水作为阴性对照,0.053mmol/L氟化钠水作为阳性对照,给龋模型鼠饲以不同氟浓度(0.023mmol/L,0.042mmol/L,0.056mmol/L)茶水,以Keyes龋齿计分标准和光镜观察作为评价指标,并用扫描电镜,电子能谱观察了茶的抗龋和
2、对釉质龋的再矿化作用。结果:不同浓度的绿茶水均可显著降低龋齿的计分(P<0.01),并对釉质龋有较明显的促进再矿化作用。关键词:茶龋病动物模型再矿化中图分类号:R151.4111虽然茶的防龋作用已为一些流行病学,整到1×10的菌落形成单位(CFU)/ml。〔1~5〕体内、体外实验所证实,但茶的抗龋机制1.3饮水尚不十分清楚。由于龋病是一种多因素疾病,市售四级湖南绿茶,粉碎后过40目筛备因此在研究、评价各种抗龋方法时,建立龋的用。实验前取茶样1g、2g、3g分别加入100ml动物模型,在近乎自然状态下,进行茶抗龋作去离子水煮沸10分
3、钟,过滤备用。茶水氟浓度用观察和机理研究,具有更高的可信度。本研用氟离子选择性电极用标准曲线法测量。究通过给大鼠感染龋细菌,并饲以高糖成分1%、2%、3%茶水的氟浓度分别为0.023饲料,在复制出龋动物模型后,观察不同浓度mmol/L,0.042mmol/L,0.056mmol/L,用绿茶水的抗龋及对釉质龋再矿化的作用。去离子水配0.053mmol/LNaF饮水。Table1Formulaofthecariogenicfodder1材料与方法FconcentrationIngredientPercentage(mg/kg)1.1致
4、龋饲料Wholewheatflour61.32#〔6〕采用致龋饲料2000配方Sucrose560.321.2细菌Skimmilkpowder280.12Dehydratedvegetable32.01变形链球菌Streptococcimutans(In-Liverpowder,whole10.32gbritt,血清C型),抗链霉素(lg/L)活化后接Yeastbrewer43.12种于牛心脑培养基(BHI),内含链霉素Sodiumchloride212500mg/L,95%N2,5%CO2培养18小时后,调1.4龋模型男,19
5、49年出生,助理研究员1湖北医科大学口腔医学院营养学报1998年第20卷第3期357〔7〕将18日龄Wistar大鼠50只(湖南医科大分。每组取三个釉质龋的样本,等离子喷碳学动物实验中心提供,清洁级2级,卫生合格(HitachiHUS-56B),扫描电镜(Hitachi证号022),随机分为5组,每组10只。喂以含氨X650)观察釉质表面形态,电子能谱仪苄青霉素、羧苄青霉素和氯霉素(1g/kg)的(EDAXPV9100)测量Ca、P的含量。#2000饲料3天。22日龄时用无菌棉签口腔取样,涂轻唾培养基(MSB)平皿,无链球菌生2结
6、果长。同天接种变链Ingbritt菌,每只鼠50l(12.1不同组大鼠体重增加的情况(表2)11×10CFU/ml)。26天口腔同样取样,涂体视显微镜观察:镜下见不同组均有龋MSB平皿(含链霉素500mg/L),有大量链球齿产生,阴性对照组龋坏较为严重(照片1),菌生长。22日龄时,每组分别饲以去离子水,有中等程度的牙本质龋产生(照片2),而其它0.053mmol/LNaF,1%、2%、3%茶水。45日各组均只见釉质龋(照片3)和轻度牙本质龋龄时处死大鼠并收集上下颌骨,体视显微镜或无龋(照片4)。龋齿计分:参照Keyes的龋下
7、观察龋齿发生情况,并按Keyes方法计齿计分标准进行各组的龋齿计分(表3)1.Negativecontrolgroup,seriousdecay.2.Negativecontrolgroup,dentincaries(longitudinalsecton)3.Theothergroup,enamelcaries4.Theothergroupswithoutcaries(longitudinalsection)(Magnifyingpower:1,3×10;2,4×20)Fig.1Thestudyoncariesanimalm
8、odeloftea(lightmicroscopy)358ActaNutrimentaSinica,Sep.1998,Vol20No.3Table2Weightgaininratat45daysofageGroupWeightgain(x±s)A5