脑缺血动物模型与抗脑缺血

《脑缺血动物模型与抗脑缺血》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、脑缺血动物模型脑缺血动物模型动物模型是医学药学研究中的一个重要手段，尤其对于缺血性脑血管病，能即刻制造或模拟血流下降或阻断，只有利用动物模型才能进行。动物模型具有方便、快捷、条件可控、脑缺血程度一致等优点。近年来，脑缺血的研究进展有利于各种动物模型的广泛应用。建立和选择理想的缺血性脑损伤动物模型，对于缺血性脑血管病研究具有重要意义。脑缺血动物模型对以下研究具有很重要的实际应用价值:(1)不同脑缺血状态下的病理学改变；(2)缺血半暗带的研究；(3)再灌注损伤；(4)缺血本身导致的病理生理学变化；(5)干预治疗对缺血性损害的保护作用；(6

2、)缺血性损害的部分机制等。脑缺血动物模型的分类各种动物模型具有不同的特点，因此应根据不同的研究目的选择最适宜的动物模型。根据动物种类分类：可分为猴、狗、大鼠、小鼠等脑缺血模型。其中啮齿类动物因价格便宜、来源充足、制作模型方法简单、存活率高、脑血管解剖和生理特点与人接近，被广泛用作脑缺血及缺血再灌注模型；根据缺血范围分类：又可分为全脑缺血和局灶性缺血两种。现将常见的脑缺血动物模型概述如下：一、全脑缺血模型(Globalcerebralischemiamodels)全脑缺血模型是完全阻断或骤然降低大脑的血流，造成全脑缺血。近年来利用啮齿类

3、动物复制全脑缺血模型，在缺血性脑损伤的研究中较为广泛。共同特点：缺血暂时广泛地影响各个脑区，但病理改变发生在易损区。大鼠四血管阻断模型[TheFour-VesselOcclusion(4VO)ModelintheRat]大鼠四脑动脉阻塞模型：双侧椎动脉和双侧颈总动脉阻断。用3％水合氯醛麻醉（300mg/kg,ip.）。然后于枕骨下作1cm左右切口，暴露第一颈椎左右两个横突孔，以1411高频小电刀插入横突孔烫闭双侧椎动脉。24h后乙醚麻醉状态下切开颅顶皮肤，于矢状缝与冠状缝相交及颞骨与人字缝相交处分别埋植脑电极，接于SJ-42多导生理记

4、录仪，以在实验过程中记录大鼠的脑电图（EEG）及翻正反射恢复时间。将大鼠仰卧位固定，分离双侧颈总动脉。大鼠清醒状态下用小动脉夹夹闭双侧颈总动脉，可见大鼠意识和翻正反射消失，眼变白，竖毛，呼吸加快。30min后去除动脉夹，造成再灌注模型。再灌同时股静脉注射60mg/kg伊文思蓝。60min后大鼠断头取脑，然后用生理盐水和丙酮混合液（3：7v/v）制成10%匀浆（W/V）。离心，取上清液，在620nm处测吸光度表示脑组织中伊文思蓝含量，以此反映受试药对脑血管通透性的影响。优点：①可产生严重的脑缺血。可较好地模拟临床上多种原因造成的全脑缺血

5、性损伤过程；②缺血一定时间后可按实验要求重新开启动脉夹进行再灌注。缺点：①成功率低，约50%；②操作相对复杂、不能一次完成，动物的死亡率高。该方法适合于脑缺血的急性实验研究，现仍被广泛应用。二、局灶性脑缺血动物模型(Focalcerebralischemiamodels)由于大脑中动脉（middlecerebralartery，MCA）是脑卒中的多发部位，因此大脑中动脉闭塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)模型被认为是一种较理想的动物模型。阻断MCA的方法主要有开颅法、线栓法以及栓塞法。最常用的是

6、线栓法线栓法(threadembolismmethod)线栓法：是目前国内外学者制备MCAO动物模型最常用的方法。该方法是Koizumi于1986年发明的。在1989年，Longa对这种方法加以改进，而后广泛用于实验性脑缺血研究。目前在脑缺血实验中多采用Longa改进的线栓法。1、线栓的制备在制备大鼠MCAO模型的过程中，线栓的制备颇为重要。将线分别截成50mm左右线栓，在前20mm用记号笔抹上颜色以作进入颅内血管深度的标记，并将线栓制备好后置肝素生理盐水中备用。线栓的制备主要有两种方法：Koizumi将栓线的前段5mm左右的部分涂上

7、硅树脂，使其变粗，变硬，直径达0.25～0.3mm，以利于进线和阻断血流；Longa法是将栓线的头端烧成小的圆头，直径稍大于线栓的直径。2、线栓的插入颈外动脉切口插入法：此种方法可以用来制备脑缺血、脑缺血再灌注模型。由颈总动脉分叉处向头端依次游离，结扎并剪断颈外动脉的分支：枕骨下动脉和甲状腺上动脉，在颈外动脉远端结扎，切断颈外动脉使其主干游离备用。然后分离颈内动脉，用丝线在颈外动脉根部打一松扣，夹闭颈总动脉和颈内动脉。将尼龙线经颈外动脉主干切口，缓慢向颈内动脉入颅方向推进，以颈总动脉分叉处为标记，推进18mm左右时感到阻力，即到达了较

8、细的大脑前动脉内，阻断了MCA的所有血供来源，扎紧颈外动脉根部松扣。在一定时间后拔出尼龙线，扎紧动脉残端，即可实现MCAO导致局灶性脑缺血-再灌模型。图1大鼠颅底内外血管（部分）模式图3、线栓法制备动物模型的影响因素栓线