益气活血法对脑出血小鼠脑内VEGFR-2活化的影响.pdf

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时间:2020-03-27

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1、论文题目:益气活血法对脑出血小鼠脑内VEGFR.2活化的影响学科、专业:研究生姓名:导师姓名及其专业技术职称:中西医结合临床崔寒尽邢之华教授中南大学二零一一年五月一夺一一,牛直月分类号益气活血法对脑出血小鼠脑内VEGFR-2活化的影响EffectofQi--tonifyingandstasis--eliminatingtherapyonactivitionofVEGFR-2inbrainofintracerebralhemorrhagicmice研究生:崔寒尽学科专业:中西结合临床学院:中南大学湘雅医院导师:邢之华教授答辩委员会主席中南大学二0

2、一一年五月原创性声明本人声明,所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均己在论文中作了明确的说明。作者签名:数日期:趔年』月丛日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容,可以采

3、用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。储繇星毖聊签本埠隰卫年』月丛日本实验受国家自然科学基金(No.30400581、30873221)资助摘要背景和目的:脑出血(intracerebralhemorrhageICH)约占所有中风类型的10.30%,其死亡率、致残率极高。目前颅内血肿清除术和对症支持治疗效果仍不理想,其半数的死亡发生在急性期,30天内死亡率高达50%,预后很差。脑出血属中医“中风"范畴。清代著名医家王清任创制的益气活血的补

4、阳还五汤是治疗中风的名方,在临床被广泛地应用,且疗效确切。近年来对补阳还五汤的研究主要集中在抑制炎症反应和细胞凋亡、纠正血液流变学异常改变、减轻兴奋性毒性和脑组织损伤,促进神经元修复、促进脑组织修复等方面。血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)作为最强的促内皮细胞有丝分裂原必须与其受体VEGFR-2(vascularendothelialgrowthfactorreceptor-2)结合,使VEGFR-2磷酸化,从而完成下游系列信号传导后,才能发挥其促进内皮细胞增殖、迁移,减少凋亡,增加

5、血管通透性等生物学效应,从而形成成熟、稳定的管维结构。本实验采用VII型胶原酶诱导建立小鼠脑出血模型,通过运用益气活血法代表方剂补阳还五汤干预,观察小鼠神经行为学改变,并采用免疫组织化学法检测各组VEGFR-2磷酸化水平,探讨益气活血法对脑出血小鼠脑内VEGFR-2磷酸化的影响,试图探索益气活血法促进血管新生的作用机制。方法:将25只昆明小鼠随机分为假手术组、脑出血组(ICH组)、脑出血+抑制剂组(ICH+SU5416组)、补阳还五汤组(BYHWT组)、补阳还五汤+抑制剂组(BⅥ{WT+SU5416组)。鼠脑立体定位向脑内苍白球注ⅥI型胶原酶0

6、.075u,建立脑出血模型。BYHWT组、BⅥ刑T+SU5416组予以补阳还五汤灌胃。假手术组、ICH组、ICH+SU5416组予以等量蒸馏水灌胃。BYHWT+SU5416组、ICH+SU5416腹腔注射VEGFR-2磷酸化抑制剂SU5416。分别于造模后1天、3天、7天三个时间点对各组小鼠进行神经行为学观察,并评分;于造模后第7天将小鼠处死,剥离颅骨取血肿区域脑组织,运用免疫组织化学方法检测各组VEGFR-2磷酸化水平。结果:1.第1天除假手术组外,其余各组小鼠在体重、神经损伤评分(NSS)、转角测试、错足测试上无明显差异(P>D酊)。第3、

7、7天两时间点,ICH组体重明显重于ICH+SU5416组,BYHWT组体重明显重于BⅥ删T+SU5416组,BYHWT组体重显著重于ICH组(尸

8、WT组磷酸化VEGFR-2表达明显高于BYHWT+SU5416组、BYHWT组磷酸化VEGFR-2表达显著高于ICH组(尸

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