杀虫蛋白基因cry8Fa2的克隆及在Bt无晶体突变株中的表达.pdf

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1、Cloning—ofBtcry8Fa2GeneandIts●amThesissubmittedtoQingdaoAgriculturalUniversiInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomyZangDakang(CollegeofAgronmyandPlantProtection)Supervisor：L。Changyouesor：LlbanonQingdao．ChinaJune,2011青岛农业大学硕士学位论文中文摘要英文摘要前言目录．IⅡ1．1苏云金芽孢

2、杆菌1．2。蛴螬1．3对蛴螬类害虫有活性的cry8类基因的研究进展1．4立题依据和目的意义试验材料与方法⋯。2．1试验材料2．2试验方法2．2．1Bt菌株B-DLLcry8基因的鉴定2．2．2cry8基因的克隆和序列分析12．2．3crySFa2基因在Ⅸ无晶体突变株中的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。．212．2．4crySFa2基因表达产物的制备和生物测定结果与分析3．1Bt菌株B-DLLcry8基因的鉴定3．2cry8基因的克隆2426⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯】}63．3crySFa2基因的序列测定及分析27283．4crySFa2

3、基因的表达．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯35讨论结论参考文献附录缩略词致谢3839404546舢6舢8删6Ⅲ2舢3川2删Y：：¨坫K埔坞侈ContentsChineseabstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．IPefface⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．11．1Bacillusthumgiensis⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．11．3Researchofcry8genet

4、oxictoscarabs．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．141．4Objectiveandmeaningofthisresearch⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．15MaterialsandMethods．⋯．⋯．．．⋯⋯．⋯．．⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．．．．．⋯⋯．⋯．．⋯⋯．．⋯．⋯⋯．162．1Materials⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．162．2Methods⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．182．2．1Identificationofcry8Fa2gene⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯182．2．2CloningandsequenceanalysisofcrySFa2gene⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．192．2．3Expressionofcry8Fa2gene⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2l2．2．4preparationandbioassayofCry8Fa2gene⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．

6、24ResultsandAnalysis：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯263．1Identificationofcry8Fa2gene⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯263．2Cloningofcry8Fa2gene⋯⋯．⋯⋯⋯．．⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯．．．．．⋯．⋯．．⋯．．．．．⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯．273．3SequenceanalysisofcrySFa2gene．．。⋯．．．⋯⋯⋯⋯⋯．．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．．⋯．⋯⋯．⋯．。。．333．4Expressionofcry8Fa2ge

7、ne⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35Discussion⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．38Conclusion⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．39References⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．40Appendix⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·45Acknowledgments⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．46青岛农

8、业大学硕士学位论文摘要苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis，简称Bt)是目前研究最深入的杀虫微生物，其杀虫蛋白基因也是应用最广泛和最有发展潜力的抗虫基因，因此，深入发掘Bt新菌株、分离