SPR生物传感器检测过敏致死动物血清类胰蛋白酶.pdf

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1、2013年第32卷第9期传感器与微系统(TransducerandMicemTechnologies)39SPR生物传感器检测过敏致死动物血清类胰蛋白酶李倩楠，熊兴良，邢扬，李广，单改仙，邓世雄(重庆医科大学法医学与生物医学信息研究室，重庆400016)摘要：应用表面等离子共振(SPR)技术检测过敏性休克死亡豚鼠血清类胰蛋白酶，试图为过敏性休克死亡提供客观诊断依据。首先，将16只健康豚鼠随机均分为实验组和对照组，每组再分为死亡即时组和冷冻3d组。以人混合血清诱发动物过敏性休克致死。采用分子自组装

2、方法将抗类胰蛋白酶单克隆抗体(Anti—TPSAB1)固定在SPR生物传感器芯片表面，检测豚鼠血清中类胰蛋白酶。实验结果表明：实验组类胰蛋白酶SPR响应值比对照组显著升高，在冷冻3d的条件下对豚鼠血清类胰蛋白酶的表达无明显影响。因此，基于SPR生物传感器在动物血清类胰蛋白酶方面具有很好的应用前景，可作为诊断过敏性休克死亡的一项依据。‘关键词：类胰蛋白酶；过敏性休克；表面等离子共振生物传感器；法医病理学中图分类号：R89文献标识码：A文章编号：1000-9787(2013)09-0039-03SP

3、RbiosensordetectionforserumtryptaseinanimalofanaphylacticshockLIQian—nan，XIONGXing—liang，XINGYang，LIGuang，SHANGai—xian，DENGShi-xiong(LaboratoryForensicandBiomedicalInformation，ChongqingMedicalUniversity，Chongqing400016，China)Abstract：Surfaceplasmonre

4、sonance(SPR)technologyisusedtodetectserumtryptaselevelsinguineapigsdiedfromanaphylacticshock．Theaimofthisstudyisattemptedtoprovideanobjectiveevidencefordiagnosisofanaphylacticshock．Firstly，sixteenhealthyguineapigsarerandomlydividedintoexperimentalgro

5、upandcontrolgroup．Foreachgroupanimalsaresub—groupedintoanimalsofinstantaneousdeathandanimalskeptat-20oCforthreedaysfreezing．Anaphylacticshockisinducedbyinjectionofhumanpooledserum．Anti—TPSAB1areimmobilizedonthesnrfaceofSPRbiosensorchipsusingself-asse

6、mblymethod，andthenSPRisadoptedtodetectthetryptaseinguineapigsserum．Theexperimentsshowthattheresponsevalueofexperimentalgroupoftryptaseissignificantlyhigherthanthecontrolgroup．Thethreedaysfreezingconditiondoesnotaffecttheexpressionforserumtryptase．The

7、reforebiosensorbasedonSPRhasgoodapplicationprospectindetectionofanimalserumtryptase，andexpressionofdetectionoftryptasemayactasanevidencefordiagnosisofanaphylacticshock．Keywords：tryptase；anaphylacticshock；surfaceplasmonresonance(SPR)biosensor；forensic

8、pathology0引言质半衰期只有几秒到几分钟，且在死后极其不稳定。类胰过敏性休克是人体对某些生物制品或药品过敏而产生蛋白酶是肥大细胞脱颗粒时释放的一种特异性蛋白，其半的一种急性全身性反应，严重者迅速进入休克状态，如不及衰期长，大于1h，死后稳定。我国正常人血清类胰蛋白酶时抢救，常可在5—10min内死亡。由于其常规尸体检验的含量平均值为2．24ng／mL，其中大多数人血清检测不无特异性病理改变，一直给法医学鉴定造成很大困扰。机到类胰蛋白酶，有研究表明：不同国家人血清类胰蛋白酶浓体初次接触变应