血糖测定(葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法)及肾上腺素对血糖浓度的影响.ppt

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时间:2020-04-05

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1、遵义医学院生物化学教研室朱欣婷实验七血糖测定(葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法)及肾上腺素对血糖浓度的影响生化教研室朱欣婷实验安排一.第一次取血(未施药)二.皮下注射肾上腺素三.实验内容的讲解四.第二次取血(注射药物后30min)五.血糖测定操作(比较注射肾上腺素前后血糖水平)六.尿糖检测生化教研室朱欣婷1.掌握葡萄糖法测定血糖浓度的原理及方法;2.观察肾上腺素对家兔血糖浓度的影响;3.熟悉尿糖的半定量检测;4.了解血糖测定的临床意义。生化教研室朱欣婷(一)血糖及其影响因素2.血糖的意义保证人体各种组织器官的能量供应。1.血糖的定义:血液中的糖称为血糖

2、,绝大多数情况下都是葡萄糖。生化教研室朱欣婷3.血糖的来源和去路血糖食物糖消化吸收肝糖原分解非糖物质糖异生氧化分解CO2+H2O糖原合成肝(肌)糖原磷酸戊糖途径等其它糖脂类、氨基酸合成代谢脂肪、氨基酸生化教研室朱欣婷4.血糖浓度的调节因素人体内,血糖水平保持恒定,并处于动态平衡状态。这种平衡不是孤立进行的,而是受神经系统,某些器官组织和各种激素调节作用来完成的。生化教研室朱欣婷调节因素1.神经系统:下丘脑+自主NS2.某些器官组织:主要为肝脏3.各种激素一、升高血糖1.肾上腺素2.胰高血糖素3.糖皮质激素二、降低血糖:胰岛素(体内唯一)葡萄糖-6

3、-磷酸酶只存在于肝、肾中,而不存在于肌肉中。所以肌糖原不能分解成葡萄糖,只能进行糖酵解或有氧氧化。交感神经(+)肝糖原分解升高迷走神经(+)肝糖原合成增加生化教研室朱欣婷肾上腺素升血糖作用机制肝+肌的细胞膜受体加速糖原分解,使血糖升高!蛋白激酶级联激活磷酸化酶cAMP生化教研室朱欣婷测定血糖的方法及优缺点特异血液量或试剂要求低易操作“真值”※葡萄糖氧化酶法Folin-Wu法邻-甲苯胺法超微量还原法己糖激酶法※方法不是基于葡萄糖的还原性测定,不受血液中非糖还原物质的影响,即“真值”。生化教研室朱欣婷葡萄糖氧化酶法原

4、理葡萄糖+O2+H2O葡萄糖酸+H2O2GOD37℃H2O2+苯酚+4-氨基安替比林红色醌类化合物+H2OPOD37℃生化教研室朱欣婷正常人在清晨空腹血糖浓度为80-120mg/100ml<70mg/100ml称为低血糖>130mg/100ml称为高血糖>160-180mg/100ml,超过肾小管的重吸收能力,部分葡萄糖随尿排出,这就是糖尿,这一血糖水平称为——肾糖阈生化教研室朱欣婷尿糖的检测尿糖主要指尿中的葡萄糖,葡萄糖含有半缩醛羟基,在热碱性溶液中将硫酸铜(二价)还原为氧化亚铜(一价)。后者沉淀,其颜色随还原性物质的多少而不同(红、黄、绿)。

5、根据沉淀的颜色,进行尿糖的半定量检查。生化教研室朱欣婷一.第一次取血(未施药)二.皮下注射肾上腺素三.实验内容的讲解四.第二次取血(注射药物后30min)五.血糖测定操作(比较注射肾上腺素前后血糖水平)六.尿糖检测生化教研室朱欣婷一.第一次取血家兔,试验前饥饿16小时,称体重以耳缘静脉取血:放血部位剪毛,酒精棉球擦拭二甲苯擦拭兔耳,使血管充血在放血部位涂一层凡士林用三菱针刺破静脉放血离心管收集,(3ml以上)干棉球压迫止血。二.皮下注射肾上腺素0.4ml/kg皮下注射30min后再采血!选择皮肤较薄、皮下组织疏松而血管较少的腹部,在注射局部用消毒

6、棉球将毛向四周分开,以左手的拇指、食指和中指将皮肤轻轻捏起,形成一个皱褶,右手将注射器针头刺入皱褶皮下,深约1.5-2厘米,药液注完后,用酒精棉球按住进针部皮肤,拔针,轻按进针部皮肤。生化教研室朱欣婷三.第二次取血(注射药物后30min)四.血糖测定操作(P55)五.尿糖检测(P56)生化教研室朱欣婷1.记录数据2.数据计算生化教研室朱欣婷1.抓兔子要小心不要被咬伤或抓伤,同时也要小心不要压死兔子。2.注射肾上腺素时,把兔子皮肤提起来,竖着进针。注射完后要等一会再把针头拔出。3.加入0.02ml血清样品时,注意沾在管壁的样品用酶酚混合试剂冲下,并

7、充分混和。

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